Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD16 para WB, ELISA - P08637 / O75015

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD16 (FcγRIIIA)

• CD16, codificado por el gen FCGR3A (receptor de la región Fc gamma de inmunoglobulina de baja afinidad III-A), es una glicoproteína transmembrana también conocida como CD16a, FcγRIIIα, FcR-10 y receptor Fc de IgG III-2.
• Como receptor clave para el fragmento Fc de la IgG, CD16 reconoce complejos inmunes antígeno-IgG agrupados y desencadena la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en células asesinas naturales (NK) y monocitos. Esta función es esencial para eliminar células diana recubiertas de anticuerpos durante la infección y la vigilancia tumoral. Referencias relacionadas: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Más allá de la actividad citotóxica, la señalización de CD16 promueve la generación de células NK adaptativas similares a la memoria que producen altos niveles de IFNG y exhiben capacidades antivirales y antitumorales mejoradas. Referencias relacionadas: PMID:24412922, PMID:25786175
• La unión de CD16 conduce a la fosforilación de adaptadores que contienen ITAM y a la activación de quinasas posteriores (por ejemplo, PI3K), así como al flujo de calcio intracelular, regulando tanto la producción de citoquinas como la desgranulación. Referencias relacionadas: PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• El receptor se localiza principalmente en la membrana celular de las células NK y un subconjunto de monocitos circulantes; también puede liberarse en forma soluble.
• CD16 es muy relevante en la inmunoterapia contra el cáncer, ya que media los efectos antitumorales de los anticuerpos terapéuticos y responde con una opsonización y ADCC mejoradas a las glicoformas de IgG afucosiladas. Referencias relacionadas: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• En el contexto de la infección por el virus del Dengue, CD16 puede contribuir a la potenciación dependiente de anticuerpos (ADE), donde los complejos IgG sub-neutralizantes facilitan la entrada viral en células mieloides, exacerbando la patogénesis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (proteína recombinante que abarca los aminoácidos 20–208 del CD16 humano) corresponde a la región extracelular; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca el CD16 nativo expresado en la superficie. Los investigadores pueden considerar el uso de tinción de células vivas o condiciones no desnaturalizantes para preservar la conformación nativa.
• Para Western blotting (WB), el peso molecular predicho de CD16 es aproximadamente 29 kDa (P08637) o 26 kDa (O75015), pero la forma glicosilada madura a menudo migra más alto. Valide el patrón de bandas observado en el sistema de muestra relevante e incluya controles de desglicosilación apropiados si es necesario.
• En ELISA, este anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o detección. Dada su reactividad cruzada con el CD16 de ratón, puede emplearse en sistemas de modelos xenógenos, pero los usuarios deben confirmar la especificidad y sensibilidad bajo sus propias condiciones experimentales.
• Dado que CD16 se expresa predominantemente en células NK y un subconjunto de monocitos, los lisados de células NK enriquecidas (por ejemplo, células seleccionadas CD56-positivas) o líneas celulares monocíticas (por ejemplo, THP-1) son controles positivos adecuados. Para el análisis a nivel de tejido, considere que la expresión de CD16 está relativamente restringida y puede requerir métodos de detección sensibles.

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