Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD16 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08637/O75015

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD16

• CD16a (FCGR3A) es un receptor de baja afinidad para el fragmento Fc de la IgG, expresado principalmente en células asesinas naturales (NK) y en un subconjunto de monocitos. Desempeña un papel central en la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) y en la producción de citocinas. Referencias relacionadas: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369, PMID:27670158
• Al unirse a dianas opsonizadas con IgG, CD16a desencadena cascadas de señalización mediadas por ITAM, lo que conduce a la activación de las células NK, la desgranulación y la lisis de las células diana. Este proceso es fundamental para la inmunidad antiviral y la vigilancia tumoral. Referencias relacionadas: PMID:24412922, PMID:25786175, PMID:29967280, PMID:9916693, PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• CD16a también puede actuar como cotransimulador de las células NK y mediar la lisis de las células diana independientemente de la unión a IgG, lo que destaca su papel en la activación inmunitaria innata. Referencias relacionadas: PMID:10318937, PMID:23006327
• El receptor media la eficacia antitumoral de los anticuerpos monoclonales terapéuticos, y se observa una actividad mejorada tras la unión a IgG afucosiladas. Referencias relacionadas: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• En el contexto de la infección por el virus del dengue, CD16a facilita el aumento dependiente de anticuerpos (ADE) al unirse a complejos de IgG1 afucosilada y virus, promoviendo la entrada viral en las células mieloides.
• A nivel subcelular, CD16a está anclado a la membrana celular mediante una hélice transmembrana y también puede encontrarse en forma secretada. Sufre fosforilación y glicosilación, procesos que modulan sus funciones de señalización.
• La expresión tisular está restringida a las células NK y a un subconjunto de monocitos, según se ha confirmado a nivel proteico. Referencias relacionadas: PMID:2526846, PMID:27670158

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio extracelular (aminoácidos 20-208) de CD16b humano, lo que sugiere que el anticuerpo reconoce un epítopo conservado entre CD16a y CD16b. Considere validar directamente la reactividad cruzada en su sistema modelo.
• Para el Western blot, se espera una banda cercana a 29 kDa (forma no glicosilada), aunque pueden aparecer manchas de mayor peso molecular debido a una glicosilación intensa. El uso de un agente reductor y la optimización del porcentaje de gel pueden mejorar la resolución.
• En IHC-P, deben anticiparse patrones de tinción de membrana; incluya controles negativos y positivos adecuados (por ejemplo, tejidos ricos en células NK, como el bazo o las amígdalas).
• Para IF/ICC, deben optimizarse las condiciones de fijación y permeabilización para preservar el epítopo extracelular; la tinción de células vivas también puede ser adecuada para detectar CD16 en la superficie.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse del uso conjunto de un anticuerpo de detección dirigido contra un epítopo distinto; considere la posible interferencia de la unión de IgG afucosilada en determinados formatos de ensayo.

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