Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD16b para WB, FC, ELISA - O75015

Especificaciones y parámetros centrales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del CD16b

• CD16b (FcγRIIIB) es un receptor de baja afinidad para la región Fc de las inmunoglobulinas gamma, codificado por el gen FCGR3B. Es una glicoproteína anclada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) sin un dominio transmembrana, lo que lo distingue del FcγRIIIA.
• El receptor se une a IgG complejada o agregada y a IgG monomérica, pero a diferencia del FcγRIIIA, no media la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) ni la fagocitosis, probablemente sirviendo como un receptor señuelo que atrapa complejos inmunes en la circulación periférica sin activar neutrófilos.
• CD16b es expresado específicamente por leucocitos polimorfonucleares (neutrófilos) y por eosinófilos estimulados, subrayando su papel en la vigilancia inmunitaria innata en granulocitos.
• Subcelularmente, CD16b se encuentra en la membrana celular y puede ser liberado en forma secretada, mediado por el clivaje de su ancla GPI.
• La proteína contiene dos dominios tipo inmunoglobulina y está extensamente glicosilada; un peso molecular predicho de aproximadamente 26 kDa (proteína central 26,243 Da) a menudo se observa como una banda difusa debido a la glicosilación.
• Las características estructurales clave incluyen un péptido señal N-terminal (aa 1-18), el dominio extracelular de unión a IgG (aa 20-208, utilizado como inmunógeno) y un sitio de unión del ancla GPI C-terminal. Múltiples alias (CD16, FCG3, FCGR3, FCR-10, FCRIII) reflejan la nomenclatura histórica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre todo el dominio extracelular de unión a IgG (aa 20-208) del CD16b humano, que es adecuado para detectar tanto proteína nativa como desnaturalizada en diversas aplicaciones.
• Para Western blot (WB), se espera una banda alrededor de 26 kDa en condiciones reductoras; puede ocurrir manchado o una banda difusa debido a la glicosilación—valide con controles positivos apropiados (por ejemplo, lisados de neutrófilos) y considere la desglicosilación si se requiere una banda nítida.
• En citometría de flujo (FC), utilice un anticuerpo secundario conjugado a fluoróforo compatible para la detección de CD16b de superficie en neutrófilos vivos y no fijados; evite métodos de fijación que puedan alterar la integridad de la proteína anclada a GPI.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; se recomienda emparejarlo con un clon anti-CD16b no competidor para formatos sándwich, y las condiciones del ensayo deben optimizarse con proteína CD16b recombinante o purificada.
• La reactividad cruzada se limita a humano; no se espera reactividad con CD16b de ratón o rata, así que elija un sistema modelo apropiado o valide con muestras humanas.

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