Anticuerpo policlonal de conejo Anti-CD171/L1CAM para WB, IF/ICC, ELISA - P32004

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD171/L1CAM

• La molécula de adhesión celular neuronal L1 (L1CAM, también designada CD171) es una molécula de adhesión celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas que existe en múltiples isoformas por empalme alternativo.
• Media la dinámica de adhesión celular y genera señales transmembrana en los receptores de tirosina quinasa, cumpliendo funciones esenciales en el desarrollo y funcionamiento del sistema nervioso.
• Durante el desarrollo cerebral, L1CAM es fundamental para la migración neuronal, el crecimiento y fasciculación axonal y la sinaptogénesis; en el cerebro adulto, contribuye a la plasticidad sináptica y la dinámica estructural.
• L1CAM se localiza en la membrana plasmática y se enriquece en proyecciones neuronales especializadas, incluyendo conos de crecimiento, axones y dendritas.
• La proteína es una glicofosfoproteína con dominios similares a inmunoglobulinas y enlaces disulfuro, y su fosforilación regula sus funciones adhesivas y de señalización.
• Las mutaciones en L1CAM están asociadas a un espectro de trastornos neurológicos, que incluyen hidrocefalia ligada al cromosoma X, síndrome MASA, paraplejia espástica tipo 1 y agenesia del cuerpo calloso.
• Se expresa de forma predominante en el sistema nervioso y también participa en procesos de migración y diferenciación celular fuera del contexto neuronal.

Guía experimental y consejos técnicos

• Diseño del inmunógeno: El inmunógeno se dirige a la región C-terminal intracelular (aminoácidos 1143-1257) de L1CAM, que está conservada en humano, ratón y rata, lo que soporta la reactividad cruzada observada. No se espera que esta región esté glicosilada, por lo que el anticuerpo puede reconocer formas tanto glicosiladas como no glicosiladas.
• Western blotting: El peso molecular predicho es de 140 kDa, pero la glicosilación extensa generalmente desplaza la banda aparente a ~200-220 kDa. Se recomienda usar condiciones reductoras y desnaturalizantes, y validar con lisados de cerebro o células neuronales.
• Inmunofluorescencia/ICC: Se requiere permeabilización para detectar el epítopo intracelular. Se sugiere fijación con PFA al 4% y permeabilización con Tritón X-100 al 0,1%. Realice co-tinción con marcadores neuronales para confirmar la especificidad en neuronas y sus proyecciones.
• ELISA: El anticuerpo se puede usar como reactivo de detección en formatos de ELISA directos o indirectos. Para ELISA sándwich, combínelo con un anticuerpo de captura dirigido a un epítopo distinto. La titulación y optimización son esenciales.

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