Anticuerpo policlonal de conejo anti-CD1D para WB, IF/ICC, ELISA - P15813

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD1D

• CD1D (R3G1) es una glucoproteína presentadora de antígenos de la familia CD1, implicada principalmente en la presentación de antígenos lipídicos a las células T asesinas naturales (NKT).
• Se une a glucolípidos propios y no propios dentro de su hendidura hidrofóbica de unión y los presenta a los receptores de células T en las células NKT, conectando la inmunidad innata y adaptativa.
• CD1D se expresa en timocitos corticales, ciertas leucemias de células T y diversos otros tejidos, lo que respalda su función en la vigilancia inmunitaria.
• La proteína se localiza en la membrana celular, la membrana basolateral celular, la membrana de los endosomas, la membrana de los lisosomas y la membrana del retículo endoplasmático, lo que refleja su tráfico a través de la vía endocítica para la carga de antígenos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glucosilación y formación de enlaces disulfuro, que contribuyen a su estabilidad estructural y función de unión a ligandos.
• El peso molecular previsto de CD1D es de aproximadamente 37,7 kDa, aunque la glucosilación puede dar lugar a un peso molecular aparente mayor (observado a 38 kDa en algunos sistemas).

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para el Western blot, considere cargar controles positivos adecuados, como líneas celulares linfoides (p. ej., Jurkat), y utilizar un tampón de carga reductor para resolver la banda de aproximadamente 38 kDa.
• Al realizar inmunofluorescencia, permeabilice las células con Triton X-100 al 0,1 % para detectar las reservas intracelulares de CD1D.
• Dado que el anticuerpo presenta reactividad cruzada con ratón, valide su especificidad en su sistema modelo utilizando controles de knockout o knockdown de CD1D.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la optimización del antígeno de recubrimiento y de las condiciones de detección.
• Este anticuerpo policlonal se obtuvo contra el dominio extracelular (aa 20-190); por lo tanto, puede detectar tanto las formas unidas a la membrana como las formas solubles de CD1D.

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