Anticuerpo policlonal de conejo anti-CD274 para WB y ELISA - Q9EP73

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD274

• CD274 (PD-L1/B7-H1) es una proteína transmembrana de tipo I de la superfamilia de las inmunoglobulinas, codificada por el gen Cd274 en el ratón (alias: B7h1, Pdcd1l1, Pdcd1lg1, Pdl1).
• Actúa como ligando del receptor inhibidor PD-1 (PDCD1), desempeñando un papel fundamental en el mantenimiento de la tolerancia inmunitaria al modular la activación de las células T y limitar las respuestas efectoras (PubMed:11238124). Referencias relacionadas: PMID:11238124
• Puede coestimular subpoblaciones de células T que producen principalmente interleucina-10 (IL10) mediante un receptor activador aún no identificado (PubMed:11015443, PubMed:12719480). Referencias relacionadas: PMID:11015443, PMID:12719480
• Los tumores aprovechan la vía PDCD1/PD-L1 para atenuar la inmunidad antitumoral; la interacción con PD-1 inhibe la función efectora de los linfocitos T citotóxicos (CTL), y el bloqueo de esta vía revierte el agotamiento de las células T, lo que proporciona una base para la inmunoterapia contra el cáncer (PubMed:12218188, PubMed:27281199). Referencias relacionadas: PMID:12218188, PMID:27281199
• La localización subcelular incluye la membrana celular, la membrana del endosoma temprano y la membrana del endosoma de reciclaje.
• Se expresa en altos niveles en el corazón, el timo, el músculo esquelético y los pulmones; y débilmente en el riñón, el bazo, la tiroides y el hígado. Se expresa en células dendríticas activadas, células B, macrófagos y numerosas líneas celulares tumorales linfoides.
• Entre sus características estructurales se incluyen dominios similares a inmunoglobulinas, un enlace disulfuro y glucosilación; también posee un péptido señal, una hélice transmembrana y sitios de ubiquitinación (palabras clave de UniProt).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aminoácidos 19-239) de CD274 de ratón, abarcando la región responsable de la interacción con PD-1; este diseño puede favorecer la detección de las formas expresadas en la superficie y solubles de la proteína en muestras de ratón.
• Para Western blot, considere utilizar condiciones reductoras de SDS-PAGE; el peso molecular no modificado previsto es de aproximadamente 33 kDa, pero la glucosilación suele dar lugar a un peso molecular aparente mayor (normalmente de 40 a 50 kDa). Incluya controles adecuados para confirmar la identidad de la banda.
• Al realizar ELISA, titule el anticuerpo para determinar las concentraciones de trabajo óptimas; valide el rendimiento utilizando proteína CD274 recombinante o células que expresen CD274 para establecer la sensibilidad y especificidad.
• Aunque se indica reactividad cruzada con humano y rata, verifique las características de unión en su contexto experimental específico, ya que la accesibilidad del epítopo puede variar entre especies y tipos de muestras.

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