Anticuerpo monoclonal anti-CD4 para citometría de flujo - P01730

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del CD4

• CD4 es una glicoproteína transmembrana y miembro de la superfamilia de inmunoglobulinas, que consta de una región extracelular con cuatro dominios tipo Ig (D1–D4), una hélice transmembrana de paso único y una cola citoplasmática corta. Se expresa principalmente en la superficie de las células T colaboradoras, así como en monocitos, macrófagos, células dendríticas y células NK.
• En las células T colaboradoras, CD4 funciona como correceptor para las moléculas de MHC clase II. Se une a regiones no polimórficas del MHC clase II en células presentadoras de antígeno, estabilizando la interacción entre el receptor de células T (TCR) y los complejos péptido-MHC, lo cual es esencial para el reconocimiento del antígeno y la activación de las células T.
• Tras la activación del TCR, CD4 recluta la quinasa de la familia Src LCK a través de su cola citoplasmática hacia la proximidad del complejo TCR-CD3. LCK fosforila los motivos de activación basados en tirosina del inmunorreceptor (ITAMs) en las cadenas de CD3, iniciando cascadas de señalización intracelular que conducen a la proliferación de células T, producción de citoquinas y diferenciación.
• Además de su función en la inmunidad adaptativa, CD4 actúa como el receptor primario para el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) mediante la interacción con la glicoproteína de envoltura viral gp120. También sirve como receptor para el herpesvirus humano 7 (HHV-7). Las proteínas Vpu y Nef del VIH-1 regulan a la baja la expresión superficial de CD4 para facilitar la salida viral y la evasión inmune. Referencias relacionadas: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607
• CD4 se modifica postraduccionalmente mediante glicosilación N-ligada, formación de enlaces disulfuro, palmitoilación en una cisteína yuxtamembrana y fosforilación por LCK. Estas modificaciones regulan el plegamiento de la proteína, la localización en la membrana y la transducción de señales.
• La expresión de CD4 es una característica definitoria de las células T colaboradoras y se utiliza comúnmente como marcador inmunofenotípico para la identificación de subconjuntos de células T. Su densidad superficial puede variar con el estado de activación y diferenciación celular.
• En macrófagos y células NK, la activación de CD4 puede desencadenar diferenciación, expresión de citoquinas y migración celular a través de vías independientes de TCR/LCK, destacando su versatilidad funcional más allá de la señalización de células T.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo está conjugado directamente con , un fluoróforo rojo lejano brillante y fotostable, listo para usar en citometría de flujo. Titula el anticuerpo para determinar la concentración óptima de tinción para tu tipo celular específico y condiciones experimentales (rango típico: 0,1–1 µg por 1×10^6 células).
• Dado que la expresión superficial de CD4 es alta en células T colaboradoras en reposo, incluye controles de isotipo apropiados y discriminación de células vivas/muertas para garantizar una tinción específica. Para paneles multicolor, combínalo con anti-CD3 y anti-CD8 para disecar exhaustivamente los subconjuntos de células T.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con CD4 humano y de cynomolgus, lo que lo hace adecuado para estudios que involucren modelos de primates no humanos. Valida el anticuerpo en tu matriz de muestra específica y protocolo de fijación/permeabilización si se requiere tinción intracelular.
• El inmunógeno es CD4 humano recombinante, que probablemente corresponde al dominio extracelular. Por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer preferentemente CD4 nativo, no desnaturalizado; las condiciones desnaturalizantes (por ejemplo, transferencia Western bajo condiciones reductoras) pueden requerir validación.
• Para aplicaciones más allá de la citometría de flujo, como inmunohistoquímica o inmunoprecipitación, se recomienda optimización y verificación independiente debido a la falta de datos del fabricante.

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