Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-CD40L para WB y ELISA - P29965

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD40L

• CD40L funciona como un ligando de citocina crucial para CD40 (TNFRSF5) en las células presentadoras de antígenos, esencial para la inmunidad humoral dependiente de células T (PubMed:1280226, PubMed:31331973). Referencias relacionadas: PMID:1280226 PMID:31331973
• Proporciona señales coestimuladoras a las células T, mejorando la proliferación y la producción de citocinas como IL-4 e IL-10 tras la unión de TCR/CD3 y la coestimulación de CD28 (PubMed:8617933). Referencias relacionadas: PMID:8617933
• La reticulación de CD40L desencadena la vía NF-kappa-B y la activación de las quinasas MAPK8 y PAK2, e induce la fosforilación de tirosina de la isoforma 3 de CD28 en las células T (PubMed:15067037). Referencias relacionadas: PMID:15067037
• Media la proliferación de células B, la conmutación de clase de inmunoglobulinas y la producción de IgE en presencia de IL-4, destacando su papel en la activación de células B.
• CD40L también es un ligando de integrina para ITGA5:ITGB1 e ITGAV:ITGB3, trabajando en concierto con CD40 para regular los resultados de señalización como la activación de células B y las respuestas antiapoptóticas.
• La proteína se localiza en la membrana celular y la superficie celular, y puede ser escindida para producir una forma secretada; se expresa específicamente en los linfocitos T CD4+ activados.
• Con una masa molecular calculada de ~29,3 kDa, la glicosilación aumenta el tamaño observado a alrededor de 33–39 kDa en su forma activa de longitud completa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 113–261, cubriendo el dominio de homología TNF extracelular crítico para la unión al receptor; este diseño puede conferir reactividad tanto a la forma unida a la membrana como a la forma soluble de CD40L.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho de CD40L sin glicosilar es de ~29 kDa, pero las formas glicosiladas pueden aparecer alrededor de 33–39 kDa; verifique la especificidad de la banda usando lisados de células T activadas o controles de proteína recombinante.
• Para aplicaciones de ELISA, considere usar el anticuerpo como reactivo de captura o detección, emparejado con un par de anticuerpos validado contra CD40L, y optimice el recubrimiento con proteína CD40L recombinante o ensayos basados en células.
• Se ha reportado reactividad cruzada con CD40L humano y de ratón; valide en la especie y el sistema de ensayo seleccionados antes de su uso.

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