Anticuerpo monoclonal anti-CD45 para WB, IHC-P, mIHC, ELISA - P08575

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD45

• CD45, designada oficialmente como tirosina-proteína fosfatasa de tipo receptor C (PTPRC), también se conoce como antígeno común de leucocitos (L-CA), T200 y B220 (en su contexto específico de isoforma). Es una glicoproteína transmembrana clave expresada en todas las células hematopoyéticas nucleadas.
• Esta fosfatasa es esencial para la activación de linfocitos T y actúa como regulador positivo de la coactivación de linfocitos T al unirse a DPP4. Su primer dominio fosfatasa posee actividad enzimática, mientras que el segundo modula la especificidad por el sustrato. Después de la activación de linfocitos T, CD45 recluta y desfosforila moléculas de señalización como SKAP1, FYN y LYN. Referencias relacionadas: PMID:35767951
• En el contexto de infección microbiana, CD45 funciona como receptor para la proteína UL11 del citomegalovirus humano, mediando la unión de UL11 a los linfocitos T. Esta interacción conduce a una reducción de la fosforilación de tirosina de proteínas de señalización después de la estimulación del TCR y a una proliferación deficiente de linfocitos T.
• A nivel subcelular, CD45 se localiza en la membrana celular, con enriquecimiento en balsas lipídicas de membrana y en la sinapsis inmunológica, lo que subraya su papel en eventos de señalización proximal.
• El gen PTPRC sufre un empalme alternativo extenso, que da lugar a múltiples isoformas (por ejemplo, isoformas 1–8) que presentan patrones de expresión distintos específicos de tejido, particularmente en timocitos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen N-glicosilación y fosforilación, y las mutaciones en PTPRC están vinculadas a la inmunodeficiencia combinada grave (IDCG).

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, tenga en cuenta el gran peso molecular (~147 kDa) utilizando un gel de SDS-PAGE de bajo porcentaje adecuado y condiciones de transferencia extendidas. Incluya un lisado de control positivo de una línea celular de leucocitos humanos (por ejemplo, Jurkat) para verificar la especificidad de la banda.
• En IHC-P y mIHC, optimice la recuperación de antígenos (por ejemplo, recuperación de epítopos inducida por calor) y titule la concentración del anticuerpo, ya que la reactividad es específica para humanos. Realice una contratinción con un colorante nuclear para visualizar la morfología celular.
• Para ELISA, este anticuerpo monoclonal puede servir como reactivo de detección; considere emparejarlo con un anticuerpo de captura que reconozca un epitopo de CD45 no superpuesto si está desarrollando un ensayo sándwich.

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