Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD45 para FC, ELISA - P08575

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD45

• CD45, también conocido como antígeno leucocitario común (L-CA) o T200, es una proteína tirosina fosfatasa de tipo receptor (PTPRC) que desempeña un papel crítico en la señalización de células inmunitarias.
• Funciona como un regulador positivo de la coactivación de células T al unirse a DPP4. El primer dominio PTPasa tiene actividad enzimática, mientras que el segundo parece afectar la especificidad de sustrato del primero. Tras la activación de células T, recluta y desfosforila SKAP1 y FYN. Desfosforila LYN, y así modula la actividad de LYN. Referencias relacionadas: PMID:35767951
• CD45 interactúa con CLEC10A en la interfaz célula presentadora de antígeno-célula T, contribuyendo a la modulación de los umbrales de activación de células T y previniendo la autoreactividad.
• Las isoformas generadas por empalme alternativo (que van desde la isoforma 1 a la 8) se expresan diferencialmente en timocitos, detectándose las isoformas 1,2,3,5,7 y no otras. Los múltiples pesos proteicos (131–147 kDa) reflejan esta diversidad de isoformas.
• A nivel subcelular, CD45 se localiza en la membrana celular, balsas lipídicas y la sinapsis inmunológica, consistente con su papel en la señalización proximal del receptor de células T.
• Como factor del huésped, CD45 actúa como receptor para la proteína UL11 del citomegalovirus humano, mediando la unión viral a las células T y el posterior deterioro de la proliferación y señalización de células T.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen una fuerte glicosilación, fosforilación, y la presencia de un péptido señal, una hélice transmembrana y dominios de fosfatasa en tándem.
• Expresado ampliamente en todas las células hematopoyéticas nucleadas, CD45 es esencial para el desarrollo y activación de linfocitos, lo que lo convierte en un marcador de diagnóstico clave para la identificación de leucocitos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado (aminoácidos 26–577) cubre la región extracelular del CD45 humano, incluyendo múltiples dominios específicos de isoforma; esta amplia región sugiere que el anticuerpo puede reconocer varias isoformas de CD45 en conformaciones nativas.
• Para citometría de flujo (FC), considere titular el anticuerpo en subconjuntos de leucocitos humanos relevantes (p. ej., PBMCs, células Jurkat) para determinar las concentraciones óptimas de tinción; incluya controles de isotipo para evaluar la unión inespecífica.
• Para aplicaciones de ELISA, evalúe formatos directos o de captura utilizando proteína CD45 recombinante o lisados celulares; confirme la linealidad y sensibilidad con curvas estándar.
• Dado que CD45 está fuertemente glicosilado, asegúrese de que la unión del anticuerpo no esté obstaculizada por la glicosilación en ciertos tipos de muestra; las condiciones desnaturalizantes pueden afectar la accesibilidad del epítopo.
• El anticuerpo se suministra en hielo; alicuote y almacene a las temperaturas recomendadas (p. ej., -20°C) para mantener la estabilidad y evitar ciclos repetidos de congelación-descongelación.

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