Anticuerpo policlonal anti-CD59 para WB, ELISA - P13987

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de CD59

• La glucoproteína CD59 (también conocida como protectina, HRF20, MACIF, MIRL y MAC-IP) es un inhibidor de la superficie celular del complejo de ataque a la membrana (MAC) del complemento.
• Inhibe eficazmente el ensamblaje del MAC al unirse a los componentes C8 (C8A y C8B) y evitar la incorporación de C9 al poro en formación, protegiendo así a las células humanas de la lisis mediada por el complemento. Referencias relacionadas: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Una forma soluble de CD59, presente en la orina, conserva la capacidad de unirse al complemento, pero presenta una actividad inhibidora del MAC considerablemente reducida en las membranas celulares.
• CD59 está anclada a la membrana plasmática mediante un enlace de glucosilfosfatidilinositol (GPI) y también puede detectarse como proteína secretada.
• La proteína experimenta múltiples modificaciones postraduccionales, incluida la glucosilación ligada a N, la formación de enlaces disulfuro y la glicación, que contribuyen a su estabilidad estructural y función.
• La deficiencia genética de CD59 está asociada con la anemia hemolítica hereditaria, lo que pone de manifiesto su papel fundamental en la protección de los eritrocitos frente al ataque del complemento.
• El gen CD59 experimenta corte y empalme alternativo, generando múltiples variantes de transcritos que pueden contribuir a la diversidad funcional.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular maduro de CD59 (aa 26–128), lo que sugiere que el anticuerpo reconoce principalmente la forma nativa anclada a GPI en las superficies celulares y las formas solubles que carecen del anclaje GPI.
• Para el análisis mediante Western blot de lisados de células o tejidos humanos, se espera una banda de aproximadamente 14 kDa; sin embargo, la N-glucosilación puede producir una banda más ancha o un peso molecular aparente ligeramente superior. Se recomienda utilizar condiciones reductoras y validar con controles adecuados.
• En aplicaciones de ELISA, este anticuerpo policlonal puede utilizarse tanto para la captura del antígeno como para la detección de CD59 en suero, plasma humano o preparaciones de proteínas recombinantes. Se recomiendan experimentos de titulación, por ejemplo, con una concentración de recubrimiento de 1–5 µg/mL, para optimizar las relaciones señal-ruido.
• Al tratarse de un reactivo policlonal, confirme experimentalmente la reactividad cruzada entre especies si estudia modelos no humanos e incluya controles negativos adecuados para tener en cuenta cualquier unión inespecífica.

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