Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD59 para WB, ELISA - P13987

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD59

• La glicoproteína CD59, también conocida como protectina, HRF20, MACIF o MIRL, es una glicoproteína de superficie celular anclada por GPI expresada principalmente en células humanas para proteger contra la lisis mediada por el complemento.
• Actúa como un potente inhibidor del complejo de ataque a membrana (MAC) del complemento, evitando el daño durante la activación del complemento al bloquear los pasos finales de la formación de poros. Referencias relacionadas: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111
• Mecánicamente, CD59 se une a las regiones de la hoja beta de los componentes C8α y C8β del MAC en formación, formando una hoja beta intermolecular que evita la incorporación de múltiples moléculas de C9 necesarias para la formación de poros osmóticos. Referencias relacionadas: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:36797260
• Una forma soluble de CD59, encontrada en orina y otros fluidos corporales, retiene la actividad de unión al complemento pero presenta una capacidad inhibitoria del MAC muy reducida en comparación con la forma unida a membrana.
• Subcelularmente, CD59 está anclado a la membrana celular a través de un resto de GPI y también se puede encontrar en formas secretadas.
• La proteína contiene características estructurales clave que incluyen múltiples enlaces disulfuro y sitios de glicación, que contribuyen a su estabilidad y función.
• Las variantes genéticas de CD59 están asociadas a la anemia hemolítica hereditaria, lo que pone de relieve su papel fundamental en la protección de los eritrocitos contra el ataque del complemento.
• El empalme alternativo produce múltiples isoformas de CD59, que pueden modular su función o localización.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno para este anticuerpo es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 49–128 de CD59 humana, dirigido a una región extracelular, por lo que es adecuado para detectar la forma nativa unida a membrana.
• Para Western Blot, se espera una banda principal de aproximadamente 14 kDa para el esqueleto peptídico no glicosilado; sin embargo, la glicosilación y la adición del anclaje GPI pueden generar especies de mayor peso molecular, por lo que debe validar con controles positivos apropiados (por ejemplo, suero humano o membranas de eritrocitos).
• En aplicaciones de ELISA, considere combinar este anticuerpo monoclonal con un clon diferente dirigido a un epítopo distinto para desarrollar un inmunoensayo sándwich sensible para la cuantificación de CD59.
• Optimice siempre la dilución del anticuerpo y las condiciones experimentales en la matriz de muestra correspondiente para garantizar la especificidad y minimizar la señal de fondo.

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