Anticuerpo policlonal de conejo anti-CD68 para WB, IF/ICC, ELISA - P34810

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD68

• CD68, también conocida como macrosialina, GP110, LAMP4 o SCARD1, es una glicoproteína transmembrana altamente glicosilada perteneciente a la familia LAMP.
• Se expresa predominantemente en la membrana de endosomas y lisosomas, pero también puede reciclarse rápidamente a la superficie celular, lo que sugiere un papel en la adhesión y motilidad celular.
• CD68 funciona en las actividades fagocíticas de los macrófagos, participando tanto en el metabolismo lisosomal intracelular como en las interacciones extracelulares célula-célula y célula-patógeno.
• Al unirse a lectinas o selectinas específicas de tejidos y órganos, CD68 facilita la migración de subconjuntos de macrófagos a sitios anatómicos específicos.
• La proteína contiene un dominio tipo mucina que probablemente está involucrado en la unión a ligandos y puede mediar la adhesión a selectinas en células endoteliales, ayudando en la diseminación de macrófagos y células tumorales.
• CD68 se expresa altamente en monocitos sanguíneos y macrófagos tisulares, y también se encuentra en linfocitos, fibroblastos, células endoteliales y varias líneas celulares tumorales.
• Múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo glicosilación N-ligada y puentes disulfuro, contribuyen a su estabilidad estructural y al cambio de peso molecular a aproximadamente 110 kDa (la forma glicosilada madura), aunque la proteína central predicha es de aproximadamente 37 kDa.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, que pueden tener funciones o patrones de expresión distintos.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (proteína recombinante correspondiente a los aminoácidos 16–200) se dirige a la región extracelular del extremo N; el anticuerpo puede reconocer tanto la proteína central como la forma glicosilada madura.
• Para Western blot (WB), es recomendable probar tanto condiciones reductoras como no reductoras, y tener en cuenta que la banda observada puede migrar entre 37 kDa (proteína central) y 110 kDa (forma glicosilada), dependiendo de la muestra y las condiciones experimentales.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), espere un patrón de tinción consistente con endosomas, lisosomas y la membrana celular; los protocolos de fijación y permeabilización deben optimizarse para el tipo celular.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir condiciones adecuadas de recubrimiento y bloqueo; considere emparejarlo con un anticuerpo de detección adecuado para ensayos tipo sándwich.
• Valide el anticuerpo en las especies relevantes (humano, ratón, rata) y en muestras de control positivo apropiadas, como líneas celulares de macrófagos (por ejemplo, THP-1, RAW 264.7) o células mononucleares de sangre periférica.

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