Anticuerpo policlonal de conejo anti-CD73/NT5E para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P21589

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD73/NT5E

• CD73/NT5E codifica la ecto-5'-nucleotidasa, una proteína de membrana anclada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) que cataliza la hidrólisis de nucleótidos monofosfato extracelulares a sus nucleósidos correspondientes y fosfato inorgánico.
• Cataliza la hidrólisis de AMP a adenosina y fosfato inorgánico, con preferencia por los monofosfatos de ribonucleótidos sobre las formas de desoxirribosa (PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347, PubMed:34403084). Referencias relacionadas:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• PMID:34403084
• Exhibe una amplia especificidad de sustrato, incluyendo IMP, UMP, GMP, CMP, dAMP, dCMP, dTMP, NAD y NMN (PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347). Referencias relacionadas:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• Localizada en la membrana celular a través de un anclaje GPI en el extremo C-terminal, posicionando el sitio activo extracelularmente para regular la señalización purinérgica y las respuestas inmunes.
• Requiere zinc como cofactor para la actividad catalítica; la enzima contiene un centro de zinc binuclear esencial para la hidrólisis del fosfato.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada y formación de enlaces disulfuro, contribuyendo a la estabilidad y función de la proteína.
• Las variantes genéticas en NT5E están asociadas con la calcificación arterial por deficiencia de CD73 (ACDC), un trastorno autosómico recesivo raro.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los residuos 27–377 de NT5E humano, que abarcan la mayor parte del dominio extracelular; este diseño favorece la detección de CD73 en la superficie celular en su conformación nativa.
• Para Western blotting (WB), considere un rango de dilución de 1:500–1:2000, y tenga en cuenta que el peso molecular predicho es de ~63 kDa; en condiciones reductoras, las formas glicosiladas pueden aparecer ligeramente más altas.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), la recuperación de antígeno con tampón de citrato (pH 6.0) suele ser beneficiosa; valide en un panel de tejidos control positivos y negativos.
• Se ha demostrado reactividad cruzada con ratón y rata, pero dadas las variaciones de secuencia específicas de especie, las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse empíricamente para cada ensayo.
• Como anticuerpo policlonal, la consistencia de lote a lote puede variar; recomendamos titular cada nuevo lote e incluir controles positivos y negativos apropiados en cada experimento.
• Para ELISA, se pueden probar formatos de recubrimiento directo de la proteína recombinante o de captura-detección; realice titulaciones en tablero de ajedrez para optimizar la relación señal-ruido.

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