Anticuerpo policlonal de conejo anti-CD74 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P04233

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD74

• CD74, también conocido como cadena gamma del antígeno de histocompatibilidad de clase II del HLA o cadena invariante (Ii), es una chaperona crítica en el procesamiento y presentación de antígenos de clase II del MHC. Sirve como receptor de superficie celular para el factor inhibidor de la migración de macrófagos (MIF).
• La proteína se une al sitio de unión a péptidos de los heterodímeros alfa/beta de MHC clase II, formando un complejo alfa-beta-CLIP que evita la carga prematura de péptidos hasta que HLA-DM facilita la liberación de CLIP en el endosoma.
• CD74 estabiliza la conformación de la catepsina L (CTSL) madura al unirse a su sitio activo, actuando como chaperona para mantener un reservorio de enzima activa en los compartimentos endocíticos y el espacio extracelular de las células presentadoras de antígenos.
• La isoforma p41 de CD74 demuestra actividad antiviral al bloquear la entrada endosomal del virus del Ébola y coronavirus, incluido el SARS-CoV-2, mediante la interrupción del procesamiento de la glicoproteína viral mediado por catepsina. Referencias relacionadas: PMID:32855215
• Subcelularmente, CD74 se encuentra en la membrana celular, retículo endoplásmico, aparato de Golgi, red trans-Golgi, endosomas y lisosomas; también se secreta.
• En células B, dos isoformas principales representan aproximadamente el 10% y el 70% de la expresión total de CD74, respectivamente.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, glicosilación, unión a proteoglicanos y formación de enlaces disulfuro, según la anotación de UniProt.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 73-232 del CD74 humano (NP_004346.1), cubriendo la región CLIP; verificar la conservación de la secuencia si se usa en especies distintas a humana y rata.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho es de 34 kDa, pero la glicosilación y las variantes de isoforma pueden causar desplazamientos de banda; validar la detección en su sistema experimental.
• En inmunohistoquímica en parafina (IHC-P), considere optimizar los protocolos de recuperación antigénica, ya que CD74 se localiza en múltiples compartimentos intracelulares.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), las condiciones de permeabilización deben probarse debido a la localización combinada en membrana e intracelular de CD74.
• Al usar ELISA, tenga en cuenta que CD74 puede secretarse; se recomienda una preparación de muestra adecuada y validación del ensayo.

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