Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD95 para ELISA, FC - P25446

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD95

• CD95 (FAS, Apo-1) es un miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral, una proteína transmembrana que media la apoptosis al unirse a su ligando FASLG.
• El dominio de muerte intracelular del receptor recluta FADD y caspasa-8, formando el complejo de señalización inductor de muerte (DISC) que desencadena cascadas apoptóticas.
• La apoptosis mediada por FAS es crítica para la tolerancia periférica y el suicidio estimulado por antígeno de las células T maduras.
• Localizado en la membrana celular y en balsas lipídicas, CD95 se expresa en varios tejidos de ratón, incluidos timo, hígado, pulmón, corazón y ovario adulto.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, lipación (palmitato) y fosforilación; la proteína contiene enlaces disulfuro y un péptido señal.
• La proteína madura tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 37 kDa, que puede aparecer más alto en condiciones reductoras debido a la glicosilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aa 22-169) abarca el dominio extracelular, lo que hace que este anticuerpo sea adecuado para detectar CD95 de superficie en condiciones nativas y desnaturalizantes.
• Para ELISA, considere recubrir con fusión recombinante CD95-Fc o usar lisados celulares; valore titular el anticuerpo a partir de 0.1-1 µg/mL como punto de partida.
• En citometría de flujo, use 0.5-2 µg por 10^6 células; incluya controles de isotipo apropiados y pasos de bloqueo para minimizar la unión inespecífica.
• Valide la especificidad del anticuerpo utilizando modelos de ratón knockout para CD95 o líneas celulares para confirmar el reconocimiento del objetivo.
• Tenga en cuenta que los niveles de expresión endógena de CD95 varían entre tejidos y estados de activación; se recomiendan experimentos piloto.

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