Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-CD99 para WB, IF/ICC, IHC-P, FC, ELISA - P14209

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD99

• CD99, también conocido como MIC2, HBA71, MIC2X, MIC2Y, MSK5X, es una glicoproteína de superficie celular codificada por el gen CD99 (también conocido como MIC2, MIC2X, MIC2Y). Originalmente se identificó como el antígeno E2 en células T.
• La proteína está involucrada en procesos de adhesión de células T y en la formación espontánea de rosetas con eritrocitos, desempeñando un papel en un paso tardío de la extravasación leucocitaria ayudando a los leucocitos a superar la membrana basal endotelial, actuando de forma independiente de PECAM1.
• CD99 sufre un empalme alternativo, produciendo múltiples isoformas que pueden tener funciones distintas.
• Localización subcelular: CD99 es una proteína transmembrana que se encuentra predominantemente en la membrana plasmática.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación y fosforilación, que pueden regular sus funciones adhesivas.
• La proteína central tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 18.8 kDa, pero debido a la glicosilación, migra a 16-19 kDa en SDS-PAGE.
• CD99 se expresa en una amplia gama de células hematopoyéticas y se utiliza como marcador de diagnóstico para el sarcoma de Ewing y los tumores neuroectodérmicos primitivos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno corresponde al dominio extracelular N-terminal (aminoácidos 24-123), es probable que el anticuerpo reconozca la forma nativa y no permeabilizada de CD99, lo que lo hace adecuado para tinción de superficie en citometría de flujo e inmunofluorescencia.
• Para Western blot, espere una banda alrededor de 16-19 kDa; el uso de condiciones reductoras puede ayudar a resolver las formas glicosiladas. Valide la especificidad con líneas celulares positivas y negativas o con silenciamiento por siRNA.
• En IHC-P, la recuperación de antígeno (por ejemplo, recuperación de epítopo inducida por calor en buffer de citrato) puede mejorar la detección; se recomienda titulación.
• Para IF/ICC, se pueden probar tanto la tinción de células fijas como de células vivas; si se utiliza fijación, la permeabilización suave puede ser opcional ya que el epítopo es extracelular.
• Incluya siempre controles de isotipo apropiados y confirme la reactividad cruzada solo con humano, según las especificaciones del producto.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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