Anticuerpo monoclonal anti-CDC27 para WB, ELISA - P30260

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CDC27

• CDC27, también conocido como APC3 o ANAPC3, es una subunidad central del complejo promotor de la anafasa/ciclosoma (APC/C), una ubiquitina ligasa E3 de gran tamaño esencial para la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:18485873 PMID:27120157 PMID:27509861
• El APC/C media la ubiquitinación de proteínas diana, formando principalmente cadenas de poliubiquitina enlazadas por Lys-11, pero también cadenas enlazadas por Lys-48 y Lys-63, así como cadenas ramificadas Lys-11/Lys-48, para desencadenar la degradación proteasomal. Referencias relacionadas: PMID:18485873 PMID:29033132
• Durante la transición de metafase a anafase, el APC/C es activado por CDC20, lo que conduce a la degradación de ciclina B y securina, impulsando así la segregación cromosómica y la salida de la mitosis. Referencias relacionadas: PMID:27120157 PMID:27509861
• La actividad del APC/C está estrictamente regulada por el complejo de checkpoint mitótico (MCC), que inhibe el APC/C hasta que todos los cromosomas estén correctamente unidos al huso mitótico, evitando el inicio prematuro de la anafase. Referencias relacionadas: PMID:27509861
• CDC27 se localiza en el núcleo, el citoplasma y el huso mitótico, lo que coincide con sus funciones dinámicas en los puntos de control del ciclo celular y la dinámica cromosómica.
• La proteína contiene repeticiones TPR y está sujeta a fosforilación, lo que resalta sus interacciones reguladoras y el control postraduccional dentro del holoenzima APC/C.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, ampliando la diversidad funcional de CDC27 en diferentes contextos celulares.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 702–824 del CDC27 humano, una región que probablemente se encuentra expuesta en la proteína nativa; este diseño puede favorecer la detección de formas tanto endógenas como recombinantes en WB.
• En WB, se espera una banda cerca de los 92 kDa; confirme la especificidad utilizando controles positivos (por ejemplo, lisado de células HeLa) y negativos adecuados, y considere el uso de un control de carga.
• Para aplicaciones de ELISA, valide la unión frente a la región del epítopo específico o al CDC27 de longitud completa para garantizar la sensibilidad y especificidad del ensayo.
• Se indica la reactividad cruzada con el CDC27 de ratón; realice pruebas en muestras de tejidos o líneas celulares de ratón relevantes si va a dirigirse a ortólogos murinos.

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