Anticuerpo policlonal de conejo anti-CDK1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P06493

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CDK1

• CDK1 (quinasa 1 dependiente de ciclina) es la subunidad catalítica del factor promotor de la fase M (MPF), esencial para la transición G2-M y el inicio de la mitosis. Fosforila numerosos sustratos para impulsar la separación de los centrosomas, la dinámica del aparato de Golgi, la ruptura de la envoltura nuclear y la condensación cromosómica. Referencias relacionadas: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720 PMID:18480403 PMID:20360007
• Su actividad está estrictamente regulada por la unión a ciclinas y la fosforilación reversible. Durante la fase G2, las fosfatasas CDC25 eliminan las fosforilaciones inhibitorias para activar CDK1, mientras que las quinasas WEE1/PKMYT1 la inhiben. Una vez que los cromosomas se alinean en la metafase, la inactivación de CDK1 por WEE1/PKMYT1 permite la salida de la mitosis y la citocinesis. Referencias relacionadas: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• CDK1 se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, incluidos el núcleo, el citoplasma, las mitocondrias y estructuras mitóticas como los centrosomas y el huso mitótico, lo que refleja sus diversas funciones en la división celular.
• Fosforila las láminas (LMNA, LMNB1, LMNB2) al inicio de la mitosis, desencadenando la desintegración de la lámina nuclear y la ruptura de la envoltura nuclear. Referencias relacionadas: PMID:2188730 PMID:2344612 PMID:37788673
• Además de la mitosis, CDK1 regula la apoptosis, los ritmos circadianos y el silenciamiento génico mediante la fosforilación de dianas como FOXO1, NR1D1 y EZH2. También actúa como receptor para la entrada del virus de la hepatitis C (VHC) en los hepatocitos.
• Entre las modificaciones postraduccionales se incluyen la acetilación, la fosforilación y la ubiquitinación, que modulan su actividad y estabilidad. CDK1 también desempeña un papel clave en los puntos de control del daño del ADN, donde la fosforilación mediada por PKR/EIF2AK2 y WEE1 detiene el ciclo celular para permitir la reparación.
• Su expresión tisular es amplia, con niveles elevados en células proliferativas y una asociación notable con los tejidos de cáncer de mama.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 198-297 de CDK1 humano, una región que contiene sitios clave de fosforilación reguladora. Asegúrese de que el epítopo no esté enmascarado por modificaciones postraduccionales en su muestra.
• Para el Western blot, se espera una banda de aproximadamente 34 kDa. Dado que CDK1 está regulada por el ciclo celular, considere sincronizar las células o enriquecer las poblaciones mitóticas para mejorar la señal.
• Al utilizarlo para inmunohistoquímica (IHC-P), optimice la recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo. Se recomienda incluir controles positivos y negativos adecuados, por ejemplo, muestras no tratadas frente a muestras con el ciclo celular detenido.
• Valide la reactividad cruzada en sus tejidos o cepas específicos de ratón o rata, ya que la homología de secuencia puede afectar a la detección.
• Este anticuerpo ha sido probado en WB, IHC-P, IF/ICC, IP y ELISA; considere realizar experimentos piloto para confirmar su idoneidad para su ensayo específico y la especie diana.

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