Anticuerpo policlonal de conejo anti-CDK12 para WB, IHC-P, ELISA - Q9NYV4

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CDK12

• CDK12 es una quinasa dependiente de ciclina que actúa como regulador clave de la elongación de la transcripción al fosforilar el dominio C-terminal (CTD) de la subunidad grande de la ARN polimerasa II (POLR2A).
• Fosforila preferentemente la serina-5 de las repeticiones del CTD que ya están fosforiladas en la serina-7, y también puede fosforilar la serina-2, modulando la procesividad de la ARN polimerasa II.
• CDK12 es necesaria para la expresión de genes implicados en la reparación del ADN, desempeñando así un papel fundamental en el mantenimiento de la estabilidad genómica.
• La quinasa también participa en el corte y empalme del ARN, posiblemente mediante la fosforilación del factor de corte y empalme SRSF1/SF2, vinculando la elongación de la transcripción con el corte y empalme cotranscripcional.
• CDK12 participa en la regulación de la señalización de las quinasas MAP, lo que puede influir en la respuesta celular a los inhibidores de estrógenos.
• A nivel subcelular, CDK12 se localiza predominantemente en el núcleo, particularmente en los speckles nucleares, que son sitios de transcripción y corte y empalme activos.
• La proteína se expresa ampliamente en diversos tejidos, lo que refleja su función general en la regulación transcripcional.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1-300), lo que puede permitir la detección de múltiples isoformas de CDK12 si el extremo N-terminal está conservado; verifique la especificidad en su sistema experimental.
• Para Western blot (WB), el peso molecular previsto es de aproximadamente 164 kDa; utilice un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, 6-8 %) y tiempos de transferencia prolongados para proteínas de alto peso molecular.
• Como anticuerpo policlonal, ofrece una detección de señal robusta, pero puede presentar variabilidad entre lotes; incluya controles positivos y negativos adecuados (por ejemplo, lisados con silenciamiento o knockout de CDK12).
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), se espera una tinción nuclear; optimice las condiciones de recuperación antigénica (por ejemplo, tampón de citrato, pH 6,0) y la dilución del anticuerpo para sus muestras tisulares.
• Se ha informado reactividad cruzada en humano, ratón y rata; valide el rendimiento si utiliza otras especies.
• El anticuerpo es adecuado para ELISA; considere utilizar proteína CDK12 recombinante como estándar para determinar el título y la especificidad del anticuerpo.

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