Anti-CDK4 Rabbit PolymAb® para WB, IP, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P11802

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CDK4

• CDK4 (Quinasa 4 dependiente de ciclina), también conocida como Proteína quinasa 4 de división celular o PSK-J3, es una serina/treonina-proteína quinasa codificada por el gen CDK4 en humanos.
• Como subunidad catalítica de los complejos ciclina D-CDK4, CDK4 fosforila e inhibe a los miembros de la familia de proteínas de retinoblastoma (RB), notablemente RB1, durante la transición G1/S del ciclo celular.
• La fosforilación de RB1 por CDK4 libera los factores de transcripción E2F, permitiendo la transcripción de genes necesarios para la entrada en la fase S y la progresión del ciclo celular.
• CDK4 también fosforila a SMAD3 de manera dependiente del ciclo celular, reprimiendo su actividad transcripcional e integrando señales mitogénicas y antimitogénicas.
• La localización subcelular incluye citoplasma, núcleo y membrana nuclear; la translocación al núcleo es facilitada por el complejo ternario ciclina D/CDK4/CDKN1B.
• Las palabras clave de UniProt destacan sus funciones en la unión a ATP, el ciclo celular, la división celular, y su regulación por acetilación y fosforilación; las variantes de enfermedad están vinculadas al cáncer.
• El peso molecular predicho es aproximadamente 34 kDa (UniProt: 33.7 kDa), y el empalme alternativo puede generar isoformas adicionales.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 204-303 de CDK4 humano. Asegúrese de que el epítopo diana sea accesible en su formato de ensayo; pueden requerirse condiciones desnaturalizantes y reductoras para el Western blot.
• Para Western blot (WB), se espera una banda alrededor de 34 kDa en lisados de líneas celulares humanas, de ratón o de rata; confirme la especificidad de la banda utilizando controles positivos y negativos apropiados.
• En inmunoprecipitación (IP), optimice las proporciones anticuerpo-lisado e incluya un anticuerpo control relevante para evaluar la eficiencia de la captura.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC-P), valide los patrones de tinción frente a las distribuciones subcelulares conocidas de CDK4 (nuclear y citoplasmática) en células proliferantes.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir el emparejamiento con un anticuerpo de detección adecuado y curvas estándar utilizando proteína CDK4 recombinante.
• Siempre realice experimentos preliminares de titulación para determinar las concentraciones de trabajo óptimas para sus muestras y protocolos específicos.

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