Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-CDK8 para WB y ELISA - P49336

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CDK8

• CDK8 es una quinasa dependiente de ciclinas y un componente central del complejo Mediador, un coactivador esencial para la transcripción regulada de casi todos los genes dependientes de la ARN polimerasa II.
• Conecta las proteínas reguladoras específicas de genes con la maquinaria de transcripción basal, formando el andamiaje para el ensamblaje del complejo de pre-iniciación con la ARN polimerasa II y los factores de transcripción generales.
• CDK8 fosforila el dominio C-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II, lo que puede inhibir la formación del complejo de iniciación de la transcripción, actuando como represor transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:10993082
• Fosforila CCNH, lo que conduce a la regulación negativa del complejo TFIIH y la represión transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:10993082
• Gracias a su interacción con MAML1, CDK8 hiperfosforila el dominio intracelular de NOTCH, promoviendo su degradación. Referencias relacionadas: PMID:15546612
• Modula selectivamente la respuesta al interferón al fosforilar el dominio de transactivación de STAT1.
• Localizada predominantemente en el núcleo, CDK8 es una serina/treonina-proteína quinasa con funciones activadoras y represoras, y sus variantes genéticas están vinculadas a trastornos del espectro autista y discapacidad intelectual.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 364–464 de la CDK8 humana, una región que puede proporcionar especificidad; se recomienda verificar la unicidad del epitopo en su sistema objetivo.
• Para Western blotting, optimice la dilución del anticuerpo usando lisados positivos conocidos para CDK8 (por ejemplo, células HeLa o HEK293) y confirme la banda esperada de ~53 kDa; se deben incluir controles de carga adecuados.
• Para ELISA, recubra con proteína CDK8 recombinante o lisados celulares y valide la linealidad de la señal en un rango de concentraciones; la reactividad cruzada con la CDK8 de ratón admite ensayos de dos especies.
• Al tratarse de un anticuerpo monoclonal recombinante de conejo, se espera una alta reproducibilidad entre lotes; sin embargo, vuelva a validar el rendimiento al aplicarlo a nuevas condiciones experimentales.
• Tenga en cuenta que CDK8 participa en eventos de fosforilación dinámicos; considere usar cócteles de inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para preservar los estados de fosfo-señalización.

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