Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CDK9 (Validado por KO) para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P50750

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CDK9

• CDK9 es una serina/treonina-proteína quinasa que sirve como subunidad catalítica del complejo del factor de elongación de la transcripción positiva b (P-TEFb), el cual fosforila el dominio C-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II para promover la elongación de la transcripción.
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• CDK9 además forma un complejo con ciclina-K que exhibe actividad quinasa hacia el CTD de la ARNP II y es esencial para el mantenimiento de la integridad del genoma al facilitar la recuperación del arresto de la replicación y limitar el daño al ADN.
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• Fosforila una amplia gama de sustratos, incluyendo EP300, MYOD1, AR, los factores de elongación negativa DSIF y NELF, y la histona H1.4, regulando así diversos procesos como la diferenciación muscular, la señalización del receptor de andrógenos y la estructura de la cromatina.
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• P-TEFb también participa en modificaciones de histonas cotranscripcionales, procesamiento de ARNm y exportación de ARNm, vinculando la elongación de la transcripción con el remodelado de la cromatina.
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• CDK9 está involucrada en redes transcripcionales inducibles por citocinas, como la activación de RELA/p65 inducida por TNF y la señalización de STAT3 inducida por IL-6, y está implicada en la patogénesis viral y el agrandamiento de los miocitos cardíacos.
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• La proteína se localiza en el núcleo y el citoplasma, y también se encuentra en cuerpos PML, consistente con sus funciones en la regulación de la transcripción y la reparación del ADN.
• CDK9 se expresa ubicuamente en todos los tejidos, reflejando su papel fundamental en la transcripción.
• Funciones adicionales incluyen la fosforilación de KAT5 para promover la actividad acetiltransferasa de histonas y la modulación de modificaciones de histonas como la monoubiquitinación de H2B, la trimetilación de H3K4 y H3K36me3.
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Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo monoclonal se generó contra un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 273-372 de la CDK9 humana, una región probablemente conservada en humano, ratón y rata, consistente con una amplia reactividad cruzada entre especies.
• Para Western blot, se espera una banda de SDS-PAGE alrededor de 43 kDa para CDK9; sin embargo, modificaciones postraduccionales o variantes de empalme pueden producir bandas adicionales. Verificar utilizando controles negativos adecuados.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), se recomienda la titulación del anticuerpo primario y la optimización de las condiciones de recuperación de antígeno para lograr relaciones señal/ruido óptimas.
• La validación por knock-out indica que este anticuerpo reconoce su diana específicamente; no obstante, cada laboratorio debe validar el anticuerpo en sus propios contextos de muestra y ensayo, idealmente utilizando controles de knockout o knockdown.
• Este anticuerpo puede usarse en inmunoprecipitación (IP) para enriquecer CDK9 y complejos asociados; para análisis posteriores, considere usar anticuerpos dirigidos a diferentes epítopos para minimizar la interferencia.

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