Anticuerpo policlonal Anti-CDK9 de conejo para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50750

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CDK9

• CDK9 es una proteína quinasa serina/treonina que funciona como subunidad catalítica del complejo del factor de elongación transcripcional positivo b (P-TEFb), el cual desempeña un papel central en la regulación de la transcripción. Referencias relacionadas: PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967
• P-TEFb fosforila el dominio C-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II y los factores de elongación DSIF y NELF, promoviendo la elongación transcripcional productiva. Referencias relacionadas: PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967, PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:9857195
• CDK9 fosforila factores de transcripción y coactivadores, incluyendo MYOD1, EP300 y el receptor de andrógenos (AR), modulando así su actividad transcripcional y selectividad de promotor. Referencias relacionadas: PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:12037670
• Regula redes de transcripción inducibles por citocinas facilitando el reconocimiento del promotor por factores de transcripción como RELA/p65 inducido por TNF y STAT3 inducido por IL-6. Referencias relacionadas: PMID:17956865, PMID:18362169
• El complejo P-TEFb está involucrado en modificaciones histónicas cotranscripcionales (p. ej., H2Bub1, H3K4me3, H3K36me3) y procesamiento del ARN, vinculando la elongación transcripcional con la dinámica de la cromatina y la maduración del ARNm. Referencias relacionadas: PMID:15564463, PMID:19575011, PMID:19844166
• CDK9 también fosforila directamente la histona H1.4 en Ser-187 y KAT5, contribuyendo a la apertura de la cromatina y al reclutamiento de histona acetiltransferasas. Referencias relacionadas: PMID:28539972, PMID:29335245
• En complejo con ciclina K, CDK9 promueve la integridad del genoma al ayudar en la recuperación del estrés de replicación, limitando la acumulación de ADN monocatenario y previniendo el colapso de la horquilla. La isoforma 2 puede funcionar adicionalmente en la reparación del ADN a través de la interacción con KU70/XRCC6. Referencias relacionadas: PMID:20493174
• CDK9 es una proteína expresada de forma ubicua que se encuentra en el núcleo y el citoplasma, localizándose en cuerpos PML; está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y ubiquitinación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 153–372 de la CDK9 humana, abarcando el dominio quinasa; esta región es conservada, por lo que el anticuerpo puede reconocer múltiples isoformas de CDK9. Valide la especificidad de la isoforma en su sistema experimental si es necesario.
• Para western blot, se espera una banda principal cerca de 43 kDa; incluya marcadores de peso molecular y controles de carga adecuados. Se ha confirmado la reactividad cruzada con muestras de ratón y rata, pero recomendamos verificar las condiciones óptimas para sus lisados específicos.
• Cuando realice inmunohistoquímica o inmunofluorescencia, optimice la fijación (p. ej., paraformaldehído) y la recuperación antigénica (p. ej., tampón citrato) para su tipo de tejido o célula. Utilice anticuerpos secundarios y contracoloraciones apropiados.
• Para ELISA, emplee protocolos indirectos estándar y valore el anticuerpo para determinar la dilución de trabajo óptima para su configuración de ensayo.

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