Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-CDKN1A/p21CIP1 para WB, IHC-P, ELISA - P38936

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CDKN1A/p21CIP1

• El inhibidor 1 de cinasas dependientes de ciclinas, designado CDKN1A, también se conoce como p21, CIP1, WAF1, SDI1, CAP20, CDKN1 y MDA-6. Funciona como un potente regulador del ciclo celular.
• CDKN1A desempeña un papel crítico en la detención del ciclo celular mediada por p53/TP53 en respuesta al daño en el ADN, bloqueando la progresión G1/S y permitiendo la reparación del ADN (PubMed:9106657). Referencias relacionadas: PMID:9106657
• La proteína se une e inhibe complejos de cinasas dependientes de ciclinas (CDK), evitando la fosforilación de sustratos clave como RB1, deteniendo así la progresión del ciclo celular.
• A relaciones estequiométricas bajas, CDKN1A promueve la localización nuclear y el ensamblaje del complejo ciclin D-CDK4, mejorando su actividad cinasa hacia RB1, mientras que a relaciones más altas inhibe el complejo.
• CDKN1A compite con POLD3 por la unión al antígeno nuclear de células en proliferación (PCNA), lo que resulta en la inhibición de la síntesis de ADN por la ADN polimerasa delta (PubMed:11595739). Referencias relacionadas: PMID:11595739
• La proteína se localiza principalmente en el núcleo, pero también se encuentra en el citoplasma. Su localización nuclear es esencial para la inhibición de CDK, y su actividad se modula mediante modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y ubiquitinación.
• CDKN1A se expresa de forma ubicua en los tejidos adultos, con niveles aproximadamente cinco veces menores en el cerebro en comparación con otros tejidos.
• Aparte de su papel canónico, CDKN1A participa en la detención G2 inducida por daño en el ADN independiente de p53 a través de la vía CREB3L1 en astrocitos y osteoblastos (Por similitud).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende los 164 aminoácidos N-terminales de CDKN1A/p21CIP1 humano, cubriendo la proteína de longitud completa; confirme que el anticuerpo detecta la p21 endógena a aproximadamente 18 kDa mediante Western blot.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), se puede observar tinción tanto nuclear como citoplasmática. Optimice la recuperación de antígenos y la dilución del anticuerpo utilizando tejidos de control positivo conocidos, como el carcinoma de colon o células en proliferación.
• En aplicaciones de ELISA, utilice proteína p21 recombinante o lisados celulares de muestras activadas por p53 para establecer curvas estándar y validar la especificidad.
• Dado que la expresión de p21 está regulada estrictamente por p53 y el estrés celular, considere tratar las células con agentes dañinos del ADN (p. ej., doxorrubicina) para inducir p21 antes de la detección.

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