Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CDKN1A/p21CIP1 para WB, IP, IF/ICC, ELISA - P38936

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CDKN1A/p21CIP1

• El inhibidor 1 de las quinasas dependientes de ciclinas (p21) es un potente inhibidor de las quinasas dependientes de ciclinas, esencial para controlar la progresión del ciclo celular en los puntos de control G1/S y G2/M. Referencias relacionadas: PMID:9106657
• Media la inhibición de la proliferación celular dependiente de p53/TP53 en respuesta al daño del ADN y también participa en la detención en G2 independiente de p53 a través de CREB3L1 en tipos celulares específicos, como astrocitos y osteoblastos.
• p21 se une a los complejos ciclina D-CDK4, ciclina E-CDK2 y ciclina A-CDK2 y los inhibe, pero en una estequiometría baja también puede facilitar el ensamblaje y la importación nuclear de los complejos ciclina D-CDK4, promoviendo así la fosforilación de RB1.
• Inhibe directamente la síntesis de ADN al competir con POLD3 por la unión al antígeno nuclear de células en proliferación (PCNA), bloqueando así la actividad de la ADN polimerasa delta. Referencias relacionadas: PMID:11595739
• La localización subcelular incluye tanto el núcleo como el citoplasma, lo que refleja sus funciones en la regulación nuclear del ciclo celular y en las funciones citoplasmáticas.
• p21 se expresa ampliamente en todos los tejidos adultos, con niveles aproximadamente cinco veces menores en el cerebro.
• La proteína está sujeta a múltiples modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación, la fosforilación y la ubiquitinación, que regulan su estabilidad, localización y función.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para el análisis mediante Western blot (WB), el peso molecular previsto es de aproximadamente 18 kDa; considere utilizar un marcador de bajo peso molecular y optimizar las condiciones de transferencia.
• En la inmunoprecipitación (IP), valide la eficiencia del anticuerpo con lisados de control positivo adecuados, como células tratadas para inducir daño en el ADN que expresen p21.
• Para la inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), p21 presenta localización tanto nuclear como citoplasmática; asegúrese de que las condiciones de permeabilización y fijación sean adecuadas para ambos compartimentos.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede evaluarse como agente de captura o de detección; valide la linealidad y la especificidad utilizando proteína p21 recombinante o lisados celulares.
• Dada su reactividad cruzada con ratón, el anticuerpo es adecuado para estudios en tejidos de ratón; no obstante, verifique su rendimiento en sus ensayos específicos.

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