Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-CDKN1A/p21CIP1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38936

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CDKN1A/p21CIP1

• CDKN1A/p21CIP1 es un inhibidor de la quinasa dependiente de ciclinas que desempeña un papel fundamental en el control de la progresión del ciclo celular y la detención en G2 inducida por daños en el ADN (PubMed:9106657). Referencias relacionadas: PMID:9106657
• La proteína actúa como un mediador clave de la inhibición dependiente de p53/TP53 de la proliferación celular en respuesta al daño en el ADN, y también participa en vías de detención en G2 independientes de p53 en ciertos tipos celulares.
• p21 se une e inhibe la actividad de las quinasas dependientes de ciclinas, evitando la fosforilación de sustratos críticos como RB1 para bloquear la progresión del ciclo celular; también facilita la localización nuclear y el ensamblaje del complejo ciclina D-CDK4, siendo su efecto sobre la actividad de la quinasa dependiente de la estequiometría.
• Inhibe la síntesis de ADN al unirse a PCNA (antígeno nuclear de células en proliferación) y competir con POLD3 por la unión a PCNA, bloqueando así la procesividad de la ADN polimerasa delta (PubMed:11595739). Referencias relacionadas: PMID:11595739
• CDKN1A se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, lo que le permite regular la maquinaria del ciclo celular y otros procesos en múltiples compartimentos subcelulares.
• Se expresa de forma ubicua en los tejidos adultos, con niveles notablemente más bajos en el cerebro.
• La proteína presenta un dominio de dedo de zinc y está sujeta a modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación y acetilación, que modulan su estabilidad e interacciones.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1-164 de la p21 humana; esta región incluye el dominio N-terminal involucrado en la unión a CDK y ciclinas, lo que potencialmente produce anticuerpos que reconocen la proteína nativa y desnaturalizada.
• Para el análisis de Western blot (WB), se prevé una banda a aproximadamente 18 kDa correspondiente a p21; sin embargo, debido a modificaciones postraduccionales, pueden observarse ligeras variaciones.
• Al realizar inmunohistoquímica (IHC-P) o inmunofluorescencia (IF/ICC), puede ser necesaria la optimización de la preparación de la muestra y la recuperación de antígenos para lograr una tinción robusta.
• Se ha notado la reactividad cruzada del anticuerpo con la p21 de ratón y rata, pero es aconsejable verificar la especificidad en el tejido objetivo o la línea celular de interés.
• Para aplicaciones de ELISA, se recomiendan titulaciones preliminares en tablero de ajedrez (checkerboard) para determinar la concentración óptima del anticuerpo de recubrimiento y detección.

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