Anticuerpo Policlonal Anti-CFI para WB y ELISA - P05156

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CFI

• CFI es una serina proteasa tipo tripsina que regula negativamente todas las vías del complemento al escindir las cadenas alfa de C3b y C4b, inactivando así estas opsoninas clave.
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• Requiere cofactores para su actividad, incluidos el factor H y C4BP en la fase fluida, y la proteína cofactor de membrana (CD46) y el receptor de complemento 1 (CR1) en las superficies celulares.
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• En células huésped sanas, la degradación de C3b depositado mediada por CFI previene la activación autóloga del complemento, mientras que en células apoptóticas o microbios que carecen de cofactores protectores, C3b permanece activo para promover la opsonización y la eliminación.
  Referencias relacionadas: PMID:28671664
• CFI se expresa principalmente en el hígado por los hepatocitos, pero también se encuentra en monocitos, fibroblastos y queratinocitos.
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• La proteína se secreta al espacio extracelular y circula en la sangre, ejerciendo su función reguladora en la fase fluida y en las superficies celulares.
• CFI contiene enlaces disulfuro, sitios de glicosilación y motivos de unión a calcio; se clasifica dentro de las serina proteasas y está involucrada en la inmunidad innata. Las mutaciones se asocian con degeneración macular relacionada con la edad y síndrome hemolítico urémico.
• La proteína tiene una masa molecular predicha de ~66 kDa y sufre glicosilación N-ligada.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aa 19-300) abarca la porción N-terminal del CFI humano, probablemente reconociendo tanto el pro-CFI como la cadena pesada madura; considere esto al interpretar los patrones de bandas.
• Para Western blot, la dilución inicial recomendada es típicamente 1:500–1:2000; se debe observar una banda esperada cerca de 66 kDa en condiciones reductoras, con posibles bandas adicionales por glicosilación o procesamiento.
• Para ELISA, las condiciones de ensayo requieren optimización; el anticuerpo puede usarse para captura o detección de antígeno, pero valide el emparejamiento con un anticuerpo complementario si utiliza un formato sándwich.
• Al analizar muestras de ratón, verifique la reactividad; aunque se indica reactividad cruzada, la intensidad de la señal puede diferir de la del CFI humano.
• Incluya siempre controles positivos y negativos apropiados, como lisados de células que expresan CFI (por ejemplo, líneas celulares derivadas de hepatocitos) y suero agotado de CFI.

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