Anticuerpo monoclonal de conejo anti-cGAS para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8N884

Especificaciones y parámetros centrales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de cGAS

• cGAS (sintasa de GMP-AMP cíclico), también conocida como MB21D1 o C6orf150, está codificada por el gen CGAS. El empalme alternativo genera múltiples isoformas.
• Funciona como una nucleotidiltransferasa que cataliza la síntesis del dinucleótido cíclico 2'3'-cGAMP a partir de ATP y GTP. Referencias relacionadas: PMID:21478870, PMID:23258413, PMID:23707061, PMID:28214358, PMID:28363908
• cGAS es un sensor citosólico de ADN fundamental que se une directamente al ADN de doble cadena (dsDNA) de longitud y curvatura suficientes, lo que conduce a la condensación en fase líquida y la activación enzimática. Referencias relacionadas: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794, PMID:30007416
• Tras la activación, el 2'3'-cGAMP producido por cGAS se une al adaptador STING1, desencadenando una cascada de señalización que induce interferones de tipo I y otros mediadores inmunitarios. Referencias relacionadas: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794
• cGAS detecta dsDNA de una amplia gama de patógenos, incluidos virus de ADN, retrovirus (por ejemplo, VIH-2) y bacterias (por ejemplo, M. tuberculosis), lo que la convierte en un centinela innato de amplio espectro. Referencias relacionadas: PMID:28363908, PMID:35613581, PMID:23929945, PMID:24269171, PMID:30270045, PMID:26048138
• Bajo estrés celular (daño mitocondrial, senescencia, daño en el ADN), el ADN propio se filtra al citoplasma o se acumula como micronúcleos, activando aberrantemente a cGAS e impulsando la inflamación estéril. Referencias relacionadas: PMID:28738408, PMID:28759889, PMID:31299200
• cGAS reside predominantemente en el citoplasma, pero también se encuentra en el núcleo, donde su unión a los nucleosomas en la cromatina inhibe su actividad para prevenir la activación autoinmune. Referencias relacionadas: PMID:31299200, PMID:32911482, PMID:32912999
• Más allá de la inmunidad, cGAS modula la reparación del daño del ADN al interactuar con PARP1 para suprimir la recombinación homóloga y detecta el estrés traducional al asociarse con ribosomas colisionados. Referencias relacionadas: PMID:30356214, PMID:31544964, PMID:34111399
• Se reporta expresión tisular en la línea celular monocítica THP1; las modificaciones postraduccionales (acetilación, fosforilación, ubiquitinación, palmitoilación) regulan dinámicamente la localización y actividad de cGAS.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido dentro de la región C-terminal (aa 430–522) de cGAS humano. Considere verificar el reconocimiento de todas las variantes de empalme si son relevantes múltiples isoformas.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 59 kDa; utilice controles positivos apropiados (por ejemplo, lisado de células THP1). Valide la especificidad del anticuerpo utilizando muestras con knockout o knockdown de cGAS.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), pueden ser necesarias condiciones optimizadas de recuperación de antígeno y permeabilización. Incluya controles apropiados para confirmar la localización nuclear/citoplásmica.
• En aplicaciones de ELISA, asegúrese de que el tampón de recubrimiento y las condiciones de detección sean compatibles con el formato monoclonal de conejo.
• La reactividad cruzada se ha probado solo contra muestras humanas; la reactividad con otras especies no está caracterizada y debe determinarse experimentalmente.

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