Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-CHAMP1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q96JM3

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CHAMP1

• CHAMP1 (proteína fosforilada de mantenimiento de la alineación cromosómica 1), también conocida como proteína de dedo de zinc 828, es una proteína nuclear con un peso molecular aparente de ~89 kDa que desempeña un papel crítico en la segregación de cromosomas mitóticos.
• Es necesaria para la alineación adecuada de los cromosomas en la placa metafásica y asegura una segregación precisa manteniendo la unión de los microtúbulos del huso a los cinetocoros durante la biorientación de las cromátidas hermanas.
• CHAMP1 puede reclutar las proteínas asociadas al cinetocoro CENPE (proteína centromérica E) y CENPF al cinetocoro, facilitando las interacciones microtúbulo-cinetocoro.
• La proteína se localiza en el núcleo y se concentra en la región del centrómero/cinetocoro de los cromosomas durante la mitosis; también se encuentra asociada con el huso mitótico y el citoesqueleto citoplasmático.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación, que probablemente regulan sus funciones mitóticas.
• CHAMP1 contiene un dominio de dedo de zinc, lo que sugiere capacidades de unión a ADN o proteínas que pueden contribuir a sus funciones de orientación a la cromatina o al cinetocoro.
• Las mutaciones en CHAMP1 están asociadas con discapacidad intelectual (MRD40/NEDHILD), lo que subraya su importancia en el neurodesarrollo y la división celular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno abarca las regiones 563–812, el anticuerpo probablemente reconoce tanto el CHAMP1 de longitud completa como cualquier isoforma que contenga esta porción C-terminal; valide la especificidad en sistemas de knockout o knockdown.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de 89 kDa; considere ejecutar un gel de alto porcentaje (p. ej., 8–10%) con un tiempo de transferencia adecuado para proteínas de alto peso molecular.
• Para inmunofluorescencia/ICC, los métodos de fijación y permeabilización pueden influir en la tinción del cinetocoro/cromosoma; pruebe la fijación con metanol o formaldehído con permeabilización con Triton X-100.
• El anticuerpo reacciona de forma cruzada con el CHAMP1 de ratón, por lo que es adecuado para estudios en líneas celulares o tejidos murinos; sin embargo, se debe verificar la alineación de secuencias en la región del inmunógeno.
• Realice experimentos de titulación por ELISA para determinar la concentración óptima de antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo para configuraciones de ELISA sándwich o directo.

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