Anticuerpo policlonal de conejo anti-Chk2 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - O96017

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Chk2

• Chk2 (quinasa 2 de los puntos de control, codificada por CHEK2) es una serina/treonina-proteína quinasa que actúa como mediador central de la respuesta al daño del ADN, fosforilando efectores posteriores para imponer la detención del ciclo celular, la reparación del ADN o la apoptosis tras roturas de doble cadena.
• Fosforila preferentemente sustratos en la secuencia consenso [L-X-R-X-X-S/T] (PubMed:37943659). Referencias relacionadas: PMID:37943659
• Chk2 regula los puntos de control G1/S, S y G2/M mediante la fosforilación e inhibición de las fosfatasas CDC25 (CDC25A, B, C), manteniendo así la fosforilación inhibitoria de tirosina en los complejos CDK-ciclina.
• Promueve la reparación del ADN mediante recombinación homóloga al fosforilar BRCA2, lo que mejora la carga de RAD51 sobre la cromatina, y estimula la transcripción de genes de reparación mediante la activación de FOXM1.
• Como supresor tumoral, Chk2 también desencadena la apoptosis al fosforilar p53/TP53 en Ser-20, reduciendo la degradación mediada por MDM2, y al activar el factor de transcripción E2F1.
• Chk2 media la inhibición de SIRT1 dependiente de CCAR2, un proceso esencial para la acetilación de p53 y la apoptosis (PubMed:25361978). Referencias relacionadas: PMID:25361978
• En condiciones de estrés oxidativo, Chk2 fosforila TRIM32 en Ser-55, promoviendo la ubiquitinación de ATG7 y regulando positivamente la autofagia (PubMed:37943659). Referencias relacionadas: PMID:37943659
• Chk2 se localiza predominantemente en el núcleo, incluidos los cuerpos PML y el nucleoplasma, y se expresa en altos niveles en los testículos, el bazo, el colon y los leucocitos de sangre periférica.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (residuos 1-220) de Chk2 humana, que incluye el dominio quinasa; considere la accesibilidad del epítopo en diferentes condiciones de fijación y desnaturalización.
• Para la transferencia Western, el peso molecular previsto es de aproximadamente 61 kDa, pero pueden aparecer bandas adicionales debido al corte y empalme alternativo o a modificaciones postraduccionales; valide la especificidad utilizando controles adecuados.
• Este anticuerpo policlonal es aplicable a la inmunoprecipitación y ELISA; para IF/ICC, se recomienda optimizar los pasos de permeabilización y bloqueo para minimizar el fondo.
• Dado que la activación de Chk2 es estimulada por el daño del ADN, el tratamiento de las células con agentes genotóxicos (por ejemplo, etopósido o radiación ionizante) puede mejorar la detección de las formas fosforiladas.

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