Anticuerpo Policlonico Anti-CHRNA1 para WB, IF, IHC, ELISA - P02708

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Información Biológica: Función y Localización de CHRNA1

• CHRNA1 codifica la subunidad alfa del receptor nicotínico de acetilcolina (AChR), un canal iónico activado por ligando que media la transmisión sináptica rápida en la unión neuromuscular. Tras la unión de acetilcolina, el receptor sufre un cambio conformacional que conduce a la apertura del canal y la entrada de cationes.
• La proteína también se conoce por varios alias: ACHRA, ACHRD, CHRNA, CMS1A, CMS1B, CMS2A, FCCMS, SCCMS. Existen dos isoformas debido al empalme alternativo: la isoforma 1 es específica del músculo esquelético, mientras que la isoforma 2 se expresa ampliamente en cerebro, corazón, riñón, hígado, pulmón y timo.
• CHRNA1 pertenece a la familia de canales iónicos activados por ligando, caracterizada por un gran dominio extracelular N-terminal, cuatro hélices transmembrana y un bucle citoplasmático. Contiene enlaces disulfuro y sitios de glicosilación críticos para el ensamblaje y la función del receptor.
• Subcelularmente, el AChR se localiza en la membrana celular postsináptica, donde se agrupa en la unión neuromuscular. Una localización adecuada requiere la interacción con rapsyn y otras proteínas de andamiaje.
• Las mutaciones en CHRNA1 están asociadas a síndromes miasténicos congénitos (SMC), incluidos CMS1A, CMS1B y CMS2A, así como al síndrome miasténico congénito de canal lento (SCCMS). Estas mutaciones alteran la cinética del canal, la expresión del receptor o la afinidad por el agonista.
• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo corresponde a los aminoácidos 105-220 de la proteína CHRNA1 humana, que se encuentra dentro del dominio extracelular. Esta región probablemente reconoce ambas isoformas y está conservada entre humanos y ratones, lo que permite la reactividad cruzada.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada y formación de enlaces disulfuro, que son importantes para el plegamiento y la estabilidad. La proteína tiene un peso molecular calculado de ~52kDa, consistente con la banda observada en western blot.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo policlonal se produce en conejo contra un fragmento recombinante (aa 105-220). Para western blot, se espera una banda alrededor de 52kDa en lisados de músculo esquelético humano y de ratón; se recomienda usar condiciones reductoras y un buffer de bloqueo adecuado para minimizar la unión no específica.
• Para inmunoprecipitación, el reconocimiento de un epitopo extracelular por este anticuerpo puede ser ventajoso; sin embargo, se recomienda la validación en el sistema de célula/tejido correspondiente.
• En inmunofluorescencia e inmunohistoquímica, los métodos óptimos de fijación y permeabilización deben determinarse empíricamente, ya que el epitopo se encuentra en el dominio extracelular que puede ser sensible a una fijación excesiva. Utilice controles adecuados como líneas celulares knockout o péptidos de bloqueo.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como captura o detección; realice una titulación para determinar la concentración de trabajo óptima.

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