Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Citrato sintasa para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75390

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Citrato Sintasa

• La proteína diana es la citrato sintasa, una enzima mitocondrial perteneciente a la familia de las transferasas, específicamente las aciltransferasas que convierten grupos acilo en grupos alquilo durante la transferencia.
• Cataliza la condensación de acetil coenzima A y oxaloacetato para formar citrato, el primer paso y limitante de la velocidad del ciclo del ácido tricarboxílico (TCA), una vía central en la producción de energía.
• Esta enzima se localiza exclusivamente en la matriz mitocondrial, donde opera el ciclo TCA, proporcionando precursores para la fosforilación oxidativa.
• Como enzima clave del ciclo TCA, la actividad de la citrato sintasa se utiliza a menudo como marcador del contenido mitocondrial y la capacidad oxidativa en los tejidos.
• La enzima sufre varias modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, metilación y conjugación con ubiquitina, que pueden modular su actividad.
• La proteína ha sido ampliamente caracterizada mediante estudios cristalográficos (estructura 3D disponible) y secuenciación proteica directa, confirmando su peso molecular de aproximadamente 52 kDa (calculado ~52 kDa a partir de NP_004068.2).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 28–145 de la citrato sintasa humana, una región probablemente expuesta después del procesamiento mitocondrial, lo que sugiere el reconocimiento de la forma endógena madura.
• Para Western blot, se espera una banda cerca de 52 kDa; cargar fracciones enriquecidas en mitocondrias o usar lisados celulares completos de tejidos metabólicamente activos puede mejorar la detección.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), asegurar una recuperación antigénica adecuada y considerar validar la señal en tejidos con alta densidad mitocondrial (p. ej., corazón, músculo esquelético).
• La reactividad cruzada del anticuerpo con la citrato sintasa de ratón y rata permite estudios en modelos preclínicos comunes; incluir siempre controles positivos y negativos apropiados para cada aplicación.
• Para aplicaciones de ELISA, las condiciones óptimas de recubrimiento y la dilución del anticuerpo deben determinarse empíricamente utilizando citrato sintasa recombinante como estándar.

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