Anticuerpo policlonal de conejo anti-CKAP5 para WB, IP, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q14008

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CKAP5

• CKAP5 (Proteína 5 asociada al citoesqueleto), también conocida como ch-TOG (Proteína del gen sobreexpresado en tumores hepáticos y de colon), es una proteína grande asociada a microtúbulos codificada por el gen CKAP5 (GeneID: 9793) con un peso molecular predicho de ~225 kDa.
• Actúa como una polimerasa procesiva de microtúbulos, uniéndose a los extremos positivos de los microtúbulos y promoviendo la nucleación y elongación de microtúbulos citoplasmáticos.
• CKAP5 juega un papel crítico en el ensamblaje del huso mitótico organizando los polos del huso y protegiendo los microtúbulos del cinetocoro de la despolimerización.
• Es un componente del complejo TACC3/ch-TOG/clatrina, que estabiliza las fibras del cinetocoro del huso mitótico actuando como un puente inter-microtúbulo. Referencias relacionadas: PMID:23532825
• CKAP5 mejora la fuerza de las uniones microtúbulo-cinetocoro mediadas por el complejo NDC80. Referencias relacionadas: PMID:27156448
• Subcelularmente, CKAP5 se localiza en el citoplasma, el centrosoma, los polos del huso y los cinetocoros durante la división celular.
• Su expresión está elevada en tumores hepáticos y de colon, así como en los cuerpos de las células de Purkinje del cerebelo, con una distribución tisular amplia que incluye músculo esquelético, cerebro, corazón, placenta, pulmón, hígado, riñón y páncreas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, y el empalme alternativo genera múltiples isoformas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1763-2032 de CKAP5 humano; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer epítopos dentro de esta región C-terminal. Considere usar controles positivos apropiados (por ejemplo, lisados de células HeLa, HEK293) para WB.
• Debido al alto peso molecular (225 kDa), asegúrese de usar geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje y tiempos de transferencia prolongados para el Western blot.
• Para aplicaciones de inmunofluorescencia, espere patrones de tinción consistentes con redes de microtúbulos, centrosomas y husos mitóticos. La co-tinción con marcadores centrosomales (por ejemplo, γ-tubulina) puede ayudar a confirmar la localización.
• Dada su naturaleza policlonal, se debe verificar la consistencia entre lotes, y se recomienda la titulación del anticuerpo para una relación señal/ruido óptima.

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