Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Cleaved-Caspase 3 p12 para WB, ELISA - P42574

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Caspasa-3

• La caspasa-3, también conocida como Apopain, CPP32, Yama o SCA-1, es una proteasa de tioles y una caspasa efectora principal que ejecuta la apoptosis tras su activación por caspasas iniciadoras (CASP8, CASP9, CASP10).
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• Tras su activación, escinde numerosos sustratos, incluyendo PARP1 en Asp216-Gly217, SREBPs, caspasas-6, -7, -9 e IL18, orquestando así la desmontaje celular.
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• Más allá de la apoptosis, contribuye a la piroptosis al escindir gasdermin-E (GSDME), inhibe la producción de interferón de tipo I durante la infección viral al dirigirse a CGAS, IRF3 y MAVS, y media la exposición de fosfatidilserina mediante scramblases de la familia XKR.
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• La caspasa-3 se localiza principalmente en el citoplasma y se expresa altamente en pulmón, bazo, corazón, hígado y riñón, con niveles moderados en cerebro y músculo esquelético, y la expresión más alta en células del sistema inmunitario.
• Su actividad está regulada por el escisión proteolítica desde el zimógeno inactivo hasta las subunidades activas p12 y p17, y sufre modificaciones postraduccionales como fosforilación, acetilación y S-nitrosilación.
• La escisión mediada por caspasa-3 de la huntingtina está implicada en la patología de la enfermedad de Huntington, y también escinde proteínas de adhesión celular como DSG2 y JUP para facilitar la desprendimiento celular apoptótico.
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Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo corresponde a la subunidad p12 de la caspasa-3 escindida (aminoácidos 171–270); por lo tanto, se espera que reconozca la forma escindida activa con alta especificidad sobre la pro-caspasa-3 de longitud completa. Sin embargo, verifique la especificidad del estado de escisión en su sistema.
• Para el análisis de Western blot, considere usar lisados celulares inducidos por apoptosis (por ejemplo, tratamiento con estaurosporina o etopósido) para detectar el fragmento p12 escindido; optimice las condiciones de carga y transferencia para esta proteína de bajo peso molecular.
• En aplicaciones de ELISA, este anticuerpo monoclonal puede ser adecuado como reactivo de detección cuando se empareja con un anticuerpo de captura que reconozca un epítopo diferente; asegúrese de la validación adecuada del par de anticuerpos en su ensayo.
• El anticuerpo está validado para muestras humanas; la reactividad cruzada con otras especies no se ha determinado, por lo que debe confirmar la reactividad si se usa con muestras no humanas.
• Como anticuerpo monoclonal de conejo, ofrece una reducida variabilidad entre lotes; no obstante, cada nuevo lote debe probarse en su aplicación específica.

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