Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Caspasa-8 Escindida (Asp384) para WB, ELISA - Q14790

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Caspasa-8

• La caspasa-8 es una proteasa de tioles que funciona como un interruptor molecular para la apoptosis, la necroptosis y la piroptosis, y es esencial para prevenir el daño tisular durante el desarrollo y la edad adulta. Referencias relacionadas: PMID:23516580 PMID:35338844 PMID:35446120
• Como caspasa iniciadora, media la apoptosis extrínseca al formar el complejo de señalización inductor de muerte (DISC) tras la activación de FAS/CD95 o TNFRSF1A, lo que lleva a la escisión y activación de las caspasas efectoras CASP3, CASP6, CASP7 y otras. Referencias relacionadas: PMID:8681376 PMID:8681377 PMID:9184224 PMID:8962078 PMID:9006941 PMID:16916640
• Existen varias isoformas: la isoforma 1 (longitud completa), la isoforma 5 y la isoforma 7 se expresan ampliamente; las isoformas que carecen del sitio catalítico actúan como inhibidores de la cascada de caspasas. Referencias relacionadas: PMID:12010809
• La proteína se localiza en el citoplasma, el núcleo y las proyecciones celulares como las lamelipodias, y sufre fosforilación en Tyr-380 para promover la migración celular independientemente de la actividad de la proteasa. Referencias relacionadas: PMID:18216014 PMID:27109099
• La caspasa-8 regula negativamente la necroptosis al escindir RIPK1 en Asp-324, limitando la actividad de la cinasa y las respuestas inflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:31827280 PMID:31827281
• También inicia la piroptosis al escindir gasdermina-C y gasdermina-D, y participa en la inmunidad innada inactivando N4BP1 aguas abajo de TLR3/4. Referencias relacionadas: PMID:32929201 PMID:34012073
• Se observa la mayor expresión en leucocitos de sangre periférica, bazo, timo e hígado, y niveles más bajos en cerebro, testículo y músculo esquelético.
• Las palabras clave incluyen: splicing alternativo, zimógeno, proteasa de tioles, variante de enfermedad e interacción huésped-virus.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 371–470 de la caspasa-8 humana (NP_203519.1), que abarca la región de la subunidad grande siguiente a la autoescisión en Asp384; por lo tanto, el anticuerpo es específico para la forma escindida y activada.
• Para Western blot, la proenzima migra aproximadamente a 55 kDa, mientras que la subunidad grande escindida aparece típicamente alrededor de 43–45 kDa. Se recomienda la inclusión de controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, células tratadas con inductores de apoptosis) para verificar la identidad de la banda.
• La optimización de ELISA puede requerir la titulación de la concentración de anticuerpo y una selección cuidadosa de los agentes de bloqueo para reducir el ruido de fondo; considere usar proteína recombinante de caspasa-8 o péptido como estándar.
• La reactividad cruzada con otras especies no se ha determinado; valide en el sistema de muestra relevante si se pretenden aplicaciones no humanas.

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