Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Gasdermina D escindida (N-terminal) para investigación de piroptosis - P57764

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Gasdermina D

• Precursor de una proteína formadora de poros que, tras ser escindida por caspasas inflamatorias, libera un fragmento N-terminal que se une a las membranas y forma poros, desencadenando la piroptosis. Referencias relacionadas: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27281216
• Promueve la piroptosis en respuesta a infecciones microbianas y señales de peligro; es escindida por CASP1, CASP4 o CASP5; se transloca a la membrana plasmática, se une a los lípidos de la capa interna y forma poros de 10 a 15 nm, permitiendo la liberación de IL1B madura, IL18 y CASP7. Referencias relacionadas: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190 PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980 PMID:33472215 PMID:37198476
• Media la activación no canónica del inflamasoma en respuesta a LPS citosólico; también forma poros en las membranas mitocondriales, liberando ADNmt, y los fragmentos N-terminal extracelulares matan bacterias directamente mediante especificidad de unión a lípidos. Referencias relacionadas: PMID:27281216
• Funciona como coactivador transcripcional en el intestino delgado tras ser escindido por CASP3/CASP7; se transloca al núcleo, coactiva STAT1 para inducir CIITA y MHC de clase II, promoviendo la tolerancia alimentaria mediada por células Tr1.
• Es escindida por el alérgeno papaína, lo que conduce a la formación de poros en la membrana plasmática y la liberación específica de IL33, impulsando una respuesta inflamatoria de tipo 2. Referencias relacionadas: PMID:35794369
• Se expresa en células suprabasales del esófago y en el istmo/cuello, fosa y glándula del estómago, lo que indica una expresión preferencial en células en diferenciación.
• La localización subcelular incluye citoplasma, citosol, inflamasoma, membrana celular, región secretada, membrana mitocondrial y núcleo; las modificaciones postraduccionales incluyen palmitoilación, fosforilación y ubiquitinación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el sitio de escisión de Asp275; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca selectivamente el fragmento N-terminal escindido en lugar de la GSDMD de longitud completa. Confirme la especificidad utilizando controles positivos y negativos adecuados.
• Para Western blot, ejecute las muestras en condiciones reductoras y busque una banda de alrededor de 30 kDa (fragmento N-terminal). Valide con lisados de células que sufren piroptosis (por ejemplo, tratamiento con LPS+ATP).
• En inmunofluorescencia/ICC, optimice las condiciones de fijación y permeabilización. El fragmento N-terminal puede localizarse en la membrana plasmática o las mitocondrias en las células piroptóticas.
• Para aplicaciones de ELISA, considere emparejamientos sándwich con un anticuerpo de captura dirigido a un epítopo diferente. Valide el rendimiento utilizando proteínas GSDMD recombinantes o material derivado de células.

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