Anticuerpo Policlonal Anti-CLEC4D para WB, IF-P, ELISA - Q8WXI8

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CLEC4D

• También conocido como Dectin-3, CD368 y CLECSF8, CLEC4D es un miembro de la familia de las lectinas tipo C que funciona como un receptor de reconocimiento de patrones (PRR) en el sistema inmunitario innato.
• CLEC4D reconoce patrones moleculares asociados a daños (DAMPs) y patrones moleculares asociados a patógenos (PAMPs) de bacterias y hongos, incluyendo α-mananos en hifas de Candida albicans y trehalosa 6,6'-dimicolato (TDM) micobacteriano. Referencias relacionadas: PMID:23602766 PMID:23911656
• Tras la unión del ligando, CLEC4D probablemente forma un complejo con la cadena gamma del receptor Fc (FCER1G) a través de CLEC4E (Mincle), lo que conduce a la fosforilación del motivo ITAM, activación de SYK-CARD9-NF-kB y la posterior maduración de las células presentadoras de antígenos con inducción de respuestas T-helper 1 y 17. Referencias relacionadas: PMID:23602766 PMID:23911656
• CLEC4D actúa como un receptor endocítico que puede facilitar la captación de antígenos en los sitios de infección para su eliminación o para su procesamiento y presentación a las células T. Referencias relacionadas: PMID:14971047
• A nivel subcelular, CLEC4D se localiza en la membrana celular como una proteína transmembrana con una sola hélice de anclaje de señal.
• La expresión tisular es predominante en monocitos y macrófagos, y puede ser regulada al alza por citoquinas como IL-6, IL-10, TNF e IFN-gamma.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la glicosilación N-ligada y la formación de enlaces disulfuro, contribuyendo a su estabilidad estructural y propiedades de unión a ligandos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 39–215 del CLEC4D humano (NP_525126.2); por lo tanto, el anticuerpo policlonal puede reconocer el dominio extracelular de unión a ligandos y potencialmente la región del tallo. Considere que la glicosilación podría influir en la accesibilidad del epítopo.
• Para la transferencia Western (Western blotting), el peso molecular predicho es de ~25 kDa, pero las formas glicosiladas pueden migrar a un peso mayor. Use controles positivos apropiados como células THP-1 estimuladas con citoquinas (p. ej., TNF o IFN-gamma) para mejorar la expresión de CLEC4D.
• En inmunofluorescencia (IF-P), se espera que el anticuerpo detecte el CLEC4D localizado en la membrana. Se requiere permeabilización si el epítopo es intracelular; de lo contrario, se puede evaluar la tinción superficial en células vivas no fijadas.
• Para ELISA, asegúrese de que la proteína recombinante o el antígeno nativo se recubran adecuadamente y considere la reactividad cruzada con homólogos de ratón y rata al diseñar los ensayos.
• Como con cualquier anticuerpo policlonal, se debe monitorear la consistencia entre lotes, y la especificidad se puede verificar utilizando muestras con CLEC4D knockout o knockdown.

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