Anticuerpo Policlonal Anti-Clusterina para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P10909

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Clusterina

• La clusterina (apolipoproteína J, TRPM-2, SGP-2) es una glucoproteína multifuncional codificada por el gen CLU; existe en formas secretadas e intracelulares debido al empalme alternativo y al procesamiento postraduccional.
• Como chaperona extracelular, la clusterina evita la agregación de proteínas no nativas y desnaturalizadas por estrés, inhibe la formación de fibrillas de amiloide y mantiene las proteínas parcialmente desplegadas para su replegamiento por otras chaperonas de manera independiente al ATP. Referencias relacionadas: PMID:11123922, PMID:19535339, PMID:12176985, PMID:17260971, PMID:12047389, PMID:17407782, PMID:17412999
• La unión de la clusterina a los receptores de la superficie celular desencadena la internalización y la degradación lisosomal/proteosómica del complejo chaperona-cliente. Referencias relacionadas: PMID:21505792
• Protege a las células de la citólisis mediada por el complemento al inhibir el ensamblaje del complejo de ataque a la membrana (MAC) mediante la prevención de la polimerización de C9. Referencias relacionadas: PMID:2780565, PMID:1903064, PMID:2601725
• La clusterina intracelular interactúa con las ligasas E3 SCF para promover la ubiquitinación y degradación proteosómica de objetivos como COMMD1 e IKBKB, y modula la actividad transcripcional de NF-κB. Referencias relacionadas: PMID:20068069, PMID:12882985
• Una forma mitocondrial suprime la liberación de citocromo c dependiente de BAX y estabiliza la integridad de la membrana mitocondrial para inhibir la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:16113678, PMID:17689225, PMID:22689054
• La localización subcelular incluye la secreción hacia fluidos biológicos, así como la presencia en citoplasma, núcleo, mitocondrias, retículo endoplasmático y vesículas citoplasmáticas.
• La clusterina se expresa de forma ubicua con niveles altos en cerebro, testículo, ovario, hígado y páncreas; se detecta en plasma sanguíneo, líquido cefalorraquídeo, leche, plasma seminal y mucosa colónica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Debido a la naturaleza policlonal y al uso de un inmunógeno recombinante, se espera que este anticuerpo detecte tanto la forma precursora como la madura de la clusterina; incluya los controles y marcadores de peso molecular apropiados.
• Para la transferencia Western (Western blot), se recomienda la optimización del bloqueo y la dilución del anticuerpo; considere realizar SDS-PAGE tanto reductor como no reductor debido a la presencia de enlaces disulfuro en la clusterina.
• En inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, valide con muestras de tejido positivas y negativas conocidas; la recuperación de antígenos puede mejorar la detección en secciones fijadas en formol e incluidas en parafina.
• Dado que la clusterina es una glucoproteína secretada, asegure un lavado exhaustivo para reducir el alto fondo en muestras que contienen suero.
• La reactividad cruzada reportada con ratón y rata permite su uso en modelos preclínicos comunes; sin embargo, verifique la conservación del epítopo para comparaciones cuantitativas.
• Siempre titule el anticuerpo en su sistema de ensayo específico para determinar la dilución de trabajo óptima.

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