Anticuerpo monoclonal Anti-COL11A1 para WB, IF/ICC, ELISA - P12107

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de COL11A1

• COL11A1 codifica la cadena alfa-1 del colágeno tipo XI, un colágeno fibrilar minoritario que desempeña un papel crucial en el ensamblaje y mantenimiento de la matriz extracelular del cartílago, al regular el crecimiento lateral de las fibras de colágeno tipo II.
• La proteína es secretada y se localiza en el espacio extracelular y la matriz extracelular (UniProt: P12107).
• Presenta expresión tejido-específica: es abundante en cartílago, placenta y algunas líneas celulares tumorales o transformadas por virus. El empalme alternativo genera isoformas con el exón IIA o IIB en el cartílago, mientras que el tendón expresa solo la isoforma del exón IIB.
• COL11A1 sufre extensas modificaciones postraduccionales, que incluyen glicosilación e hidroxilación, y contiene enlaces disulfuro y sitios de unión a calcio, lo que contribuye a su estabilidad estructural.
• Las mutaciones en COL11A1 se asocian a un espectro de trastornos del tejido conectivo, que incluyen el síndrome de Stickler, la sordera no sindrómica (DFNA37), cataratas, enanismo y displasia ectodérmica.
• La proteína tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 181 kDa, pero múltiples isoformas y eventos de procesamiento generan variantes que van de 167 a 182 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a una secuencia peptídica específica (aa 301–400); confirme la conservación de este epítopo si amplía el uso a otras especies o isoformas.
• Para Western blotting, utilice un gel de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6–8%) y condiciones de transferencia optimizadas para proteínas de alto peso molecular; múltiples bandas pueden reflejar la diversidad de isoformas.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, incluya pasos de permeabilización para acceder al colágeno localizado en la matriz extracelular y valide con marcadores específicos de matriz.
• Para ELISA, considere utilizar un formato sándwich con un par compatible u optimizar las condiciones de recubrimiento, debido a la naturaleza grande y glicosilada del antígeno.
• La preparación de muestras para la extracción de colágeno de tejido a menudo se beneficia de tratamientos con pepsina u otras proteasas para liberar fibras intactas; tenga en cuenta que esto puede alterar los epítopos.

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