Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-COL2A1 para WB, ELISA - P28481

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de COL2A1

• La cadena alfa-1(II) del colágeno (COL2A1), también conocida como colágeno tipo II alfa-1, es un colágeno fibrilar principal y el colágeno predominante en el cartílago. Está codificado por el gen Col2a1 en ratones y representa la forma homotrimérica del colágeno tipo II.
• El colágeno tipo II es esencial para el desarrollo embrionario normal del esqueleto, apoya el crecimiento lineal y proporciona la estructura que permite al cartílago resistir fuerzas de compresión, una propiedad crítica para la función articular y la integridad tisular.
• La proteína es miembro de la superfamilia del colágeno, caracterizada por su dominio de triple hélice compuesto por motivos repetidos Gly-X-Y, donde X suele ser prolina e Y es hidroxiprolina, lo que le confiere una estabilidad mecánica única.
• COL2A1 es secretada y se localiza en la matriz extracelular de los tejidos cartilaginosos, donde interactúa con otros componentes de la matriz, como proteoglicanos y colágenos minoritarios, para formar una red altamente organizada.
• Las modificaciones postraduccionales, que incluyen hidroxilación, glicosilación y la formación de enlaces disulfuro, son críticas para la estabilidad de su triple hélice y su ensamblaje en fibrillas de colágeno maduras. La proteína también se une al calcio, lo que puede influir en la formación de fibrillas y la mineralización de la matriz.
• La especificidad tisular se limita al cartílago, lo que convierte a COL2A1 en un marcador clave para la investigación de diferenciación de condrocitos y biología del cartílago. Las mutaciones o la expresión aberrante están vinculadas a displasias esqueléticas y osteoartritis.
• La proteína sufre empalme alternativo, generando isoformas que pueden tener roles distintos en el desarrollo y la enfermedad, aunque la forma de longitud completa es la más abundante en el cartílago sano.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es una proteína de fusión recombinante correspondiente a los aminoácidos 1331-1487 de la región C-terminal de COL2A1 de ratón, lo que puede conferir reactividad con la proteína nativa en muestras de ratón y rata; se recomienda verificar la especificidad en la especie de interés.
• Para Western blot (WB) en condiciones reductoras, se espera una banda en el rango de 132-142 kDa (aproximadamente 142 kDa predicho a partir de la secuencia de ratón) en lisados de cartílago; tenga en cuenta que el colágeno tipo II puede formar oligómeros de orden superior, por lo que se recomienda optimizar la preparación de muestras y los controles de carga.
• El rendimiento de ELISA puede mejorar al usar la misma proteína recombinante como antígeno de recubrimiento; los usuarios deben validar la titulación del anticuerpo y las condiciones de detección en su formato de ensayo específico.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, puede producirse una ligera variación entre lotes; es recomendable confirmar la sensibilidad y la reactividad cruzada en experimentos piloto antes de su uso a gran escala.

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