Anticuerpo Policlonal Anti-COL4A4 para WB y ELISA - P53420

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de COL4A4

• La cadena alfa-4(IV) del colágeno, codificada por el gen COL4A4, es un componente estructural principal del colágeno de tipo IV, que forma una malla de tipo "malla de pollo" en las membranas basales junto con lamininas, proteoglicanos y entactina/nidógeno.
• Los heterotrímeros de colágeno de tipo IV están formados por cadenas alfa; la alfa-4(IV) se encuentra típicamente en combinación con las cadenas alfa-3(IV) y alfa-5(IV), formando redes esenciales en membranas basales especializadas.
• La proteína se secreta en la matriz extracelular y es un componente central de las membranas basales glomerulares (MBG), desempeñando un papel estructural crítico en la filtración renal.
• La distribución tisular es mayor en riñón, calvaria, neuroretina y músculo cardíaco; la expresión es menor en cerebro, pulmón y timo; no se detecta en hígado, piel, íleon, páncreas o glándula suprarrenal (a nivel proteico).
• En el ojo, COL4A4 se expresa en la membrana de Bruch, la membrana limitante interna, las capas retinianas y alrededor de los vasos sanguíneos, contribuyendo a la integridad de la membrana basal ocular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la hidroxilación de residuos de prolina y lisina, la formación de enlaces disulfuro y la glicosilación, esenciales para la estabilidad y función del colágeno.
• Las mutaciones en COL4A4 están asociadas al síndrome de Alport, un trastorno genético caracterizado por enfermedad renal progresiva, pérdida de audición y anomalías oculares.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a una región específica (aa 1573-1690) de la COL4A4 humana; tenga en cuenta que el anticuerpo puede reconocer un epitopo lineal dentro de este dominio y puede no detectar isoformas que carezcan de él.
• Para Western blot (WB), se espera una banda principal de aproximadamente 164 kDa en lisados de tejido renal o retiniano humano; bandas adicionales pueden reflejar modificaciones postraduccionales o productos de degradación.
• En ELISA, optimice la concentración de recubrimiento y la dilución del anticuerpo usando un protocolo indirecto estándar con proteína COL4A4 recombinante o extractos de tejido; incluya los controles negativos adecuados.
• Valide la reactividad cruzada con otros miembros de la familia del colágeno si es necesario, ya que los anticuerpos policlonales pueden presentar reactividad frente a dominios colágenos conservados.

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