Anticuerpo policlonal de conejo anti-colágeno I/COL1A1 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P02452

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del colágeno I/COL1A1

• La cadena alfa-1(I) del colágeno (COL1A1) es un componente principal del colágeno tipo I, el colágeno fibrilar más abundante en los vertebrados. Pertenece a la familia de colágenos del grupo I.
• El colágeno tipo I es un heterotrímero formado por dos cadenas alfa-1(I) y una cadena alfa-2(I), que constituyen el principal elemento estructural de la matriz extracelular (MEC) en los tejidos conjuntivos.
• La proteína se secreta al espacio extracelular y se deposita en la MEC, donde experimenta extensas modificaciones postraduccionales, incluidas hidroxilación, glucosilación y formación de enlaces disulfuro, para ensamblarse en fibrillas maduras.
• Su distribución tisular se concentra principalmente en tendones, ligamentos y huesos; en el hueso, las fibrillas de colágeno se mineralizan con hidroxiapatita de calcio, proporcionando resistencia a la tracción e integridad estructural.
• El corte y empalme alternativo y el procesamiento proteolítico generan múltiples isoformas; las mutaciones en COL1A1 están asociadas con trastornos del tejido conjuntivo, como la osteogénesis imperfecta, el síndrome de Ehlers-Danlos y ciertas formas de enanismo.
• Entre las características adicionales anotadas se incluyen la unión a metales (calcio), residuos fosforilados y una modificación con ácido pirrolidona carboxílico en el extremo N-terminal, lo que refleja la compleja regulación de su maduración y función.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que corresponde a los residuos 1151–1250 del COL1A1 humano (NP_000079.2), una región cercana al extremo C-terminal. Este diseño puede favorecer la detección del procolágeno de longitud completa o de las cadenas de colágeno maduras, dependiendo del procesamiento de la muestra.
• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 139 kDa; las condiciones reductoras pueden ayudar a resolver los monómeros de colágeno, mientras que las condiciones no reductoras preservan los oligómeros de orden superior. En lisados tisulares, considere un pretratamiento con colagenasa para confirmar la especificidad.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC-P), el colágeno es predominantemente extracelular; puede ser necesaria una permeabilización adecuada (por ejemplo, con Triton X-100) y la recuperación antigénica (para secciones incluidas en parafina). La tinción conjunta con marcadores de la MEC o la detección en secciones de hueso descalcificado pueden proporcionar una validación adicional.
• Para aplicaciones de ELISA, pueden explorarse formatos directos o tipo sándwich. El recubrimiento con péptidos o la captura mediante un segundo anticuerpo puede mejorar la sensibilidad al trabajar con matrices biológicas complejas, como suero o extractos tisulares.

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