Anticuerpo policlonal anti-Colágeno I/COL1A2 para WB, IF/ICC, ELISA - P08123

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la cadena alfa-2(I) del colágeno

• La cadena alfa-2(I) del colágeno es una subunidad del colágeno tipo I, el colágeno fibrilar más abundante en el cuerpo humano, que proporciona resistencia a la tracción a los tejidos conectivos.
• Junto con dos cadenas alfa-1(I), forma la molécula de procolágeno tipo I heterotrimérico, que sufre procesamiento proteolítico para ensamblarse en fibrillas de colágeno maduras.
• El colágeno tipo I es un componente estructural principal de la matriz extracelular en la piel, el hueso, los tendones, los ligamentos y otros tejidos conectivos, donde se organiza en fibrillas que se mineralizan con hidroxiapatita de calcio en los huesos.
• La proteína se sintetiza como una preproproteína con un péptido señal, y la cadena madura se secreta al espacio extracelular, contribuyendo al ensamblaje supramolecular de las fibras de colágeno.
• Expresión específica de tejido: altamente expresada en tendón, ligamento y hueso, siendo la organización de las fibrillas crítica para las propiedades biomecánicas; las mutaciones en COL1A2 causan osteogénesis imperfecta y síndrome de Ehlers-Danlos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la hidroxilación de residuos de prolina y lisina, glicosilación y formación de enlaces disulfuro, que son esenciales para la estabilidad de la triple hélice y el entrecruzamiento de las fibrillas.
• La proteína contiene un gran dominio de triple hélice con repeticiones características de Gly-X-Y, donde X suele ser prolina e Y suele ser hidroxiprolina, y desempeña un papel en la adhesión celular a través de sitios de unión a integrinas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de la región C-terminal (aa 1161-1260) de COL1A2 humano, que puede reconocer tanto la forma pro como el colágeno maduro; valide en su sistema de muestra.
• Para Western blot, utilice condiciones de SDS-PAGE reductoras para disociar los trímeros de colágeno; tenga en cuenta que el peso molecular teórico de la cadena pro-alfa-2 es de ~129 kDa, pero las formas procesadas maduras pueden aparecer más pequeñas.
• Al realizar inmunofluorescencia (IF/ICC), considere que el colágeno es secretado; si se tiñe el procolágeno intracelular, incluya pasos de permeabilización y co-localice con marcadores de RE/Golgi.
• Las aplicaciones de ELISA pueden usarse para detectar fragmentos de colágeno solubles o colágeno secretado en sobrenadantes de cultivo celular; optimice las condiciones de recubrimiento y detección para su matriz.
• El anticuerpo reacciona de forma cruzada con ratón y rata, lo que respalda estudios traslacionales en modelos animales de fibrosis, enfermedades óseas y cicatrización de heridas.

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