Anti-Colágeno XVII/COL17A1 mAb de conejo para WB, IHC-P, ELISA - Q9UMD9

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización del Colágeno XVII/COL17A1

• El colágeno XVII, también conocido como antígeno 2 del pénfigo ampolloso de 180 kDa (BP180) y antígeno 2 del pénfigo ampolloso, está codificado por el gen COL17A1 y pertenece a la superfamilia de los colágenos, cuenta con un dominio transmembrana y múltiples repeticiones colágenas.
• Es un componente estructural clave de los hemidesmosomas y cumple un papel fundamental en la unión de los queratinocitos basales a la membrana basal subyacente, contribuyendo así a la cohesión dermoepidérmica.
• La proteína sufre procesamiento proteolítico para generar un antígeno de enfermedad IgA lineal de 120 kDa (LAD-1), que actúa como componente de los filamentos de anclaje y es el blanco de autoanticuerpos en la dermatosis ampollosa por IgA lineal.
• COL17A1 se localiza principalmente en las uniones celulares, específicamente en los hemidesmosomas, y también se encuentra como proteína secretada en la matriz extracelular y la membrana basal.
• Su expresión tisular es predominante en los epitelios escamosos estratificados, incluyendo piel, córnea, mucosa oral, esófago, intestino, conductos colectores renales, uréter, vejiga, uretra y timo; está ausente en pulmón, vasos sanguíneos, músculo esquelético y nervios.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen hidroxilación, glicosilación y fosforilación, con enlaces disulfuro que estabilizan su estructura; también está sujeto a empalme alternativo.
• Las mutaciones en COL17A1 están asociadas a la epidermólisis bullosa conjuntiva (JEB), lo que pone de manifiesto su papel esencial en el mantenimiento de la integridad epitelial.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de los aminoácidos 1300–1400 del COL17A1 humano (Q9UMD9), que se encuentra en la región extracelular. Ten esto en cuenta al diseñar los protocolos de detección para garantizar que el epítopo esté expuesto.
• Para Western blotting (WB), el peso molecular predicho es de aproximadamente 150 kDa; sin embargo, también se pueden detectar formas procesadas (por ejemplo, el fragmento LAD-1 de 120 kDa) dependiendo de la preparación de la muestra y el tipo de tejido.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), valide el anticuerpo en tejidos de control positivo como la piel humana o la córnea, donde se espera una tinción hemidesmosomal intensa. Pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígeno para una exposición óptima del epítopo.
• Dado que COL17A1 es una proteína transmembrana con fragmentos del ectodominio secretados, considera usar tampones de lisis y controles adecuados para diferenciar entre la forma de longitud completa y las formas desprendidas en ELISA u otros ensayos.
• La reactividad cruzada está confirmada para muestras humanas; el rendimiento en otras especies no ha sido probado. Valide la especificidad de especie si es necesario.

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