Anticuerpo policlonal de conejo anti-factor D del complemento para WB, ELISA - P00746

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del factor D del complemento

• El factor D del complemento (CFD), también denominado Adipsina, activador de la C3 convertasa o factor D de Properdina, es una serina proteasa que actúa como enzima iniciadora de la vía alternativa del complemento, un componente crítico de la inmunidad innata. Referencias relacionadas: PMID:21205667, PMID:22362762, PMID:6769474
• Su función consiste en escindir el factor B del complemento (CFB) cuando este se encuentra unido a C3b, formando así la C3 convertasa activa (C3bBb) de la vía alternativa. Referencias relacionadas: PMID:21205667, PMID:6769474, PMID:874324
• La vía alternativa se inicia mediante la hidrólisis espontánea del C3 del complemento, y la activación mediada por CFD genera C3 y C5 convertasas, que amplifican la cascada del complemento y promueven la opsonización, la inflamación y la lisis de patógenos. Referencias relacionadas: PMID:21205667, PMID:22362762, PMID:6769474
• El CFD es una proteína secretada, liberada en el torrente sanguíneo y en los fluidos extracelulares, donde lleva a cabo su función proteolítica.
• Se sintetiza como una preproproteína con un péptido señal y un péptido de activación; la enzima activa madura se genera mediante la eliminación proteolítica del péptido de activación. Estructuralmente, posee enlaces disulfuro canónicos característicos de las serina proteasas de tipo tripsina.
• Las mutaciones en el gen CFD están relacionadas con deficiencias del complemento y una mayor susceptibilidad a las infecciones, lo que subraya su papel esencial en la defensa inmunitaria.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno consiste en una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 26–253 del CFD humano, lo que corresponde a la enzima activa madura. Por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca tanto la proforma como la proteasa activa.
• En el análisis de Western blot (WB), se anticipa una banda específica de aproximadamente 27 kDa en condiciones reductoras. Las condiciones no reductoras pueden revelar multímeros unidos por puentes disulfuro o variantes conformacionales; considere probar ambas condiciones.
• Para aplicaciones de ELISA, este anticuerpo policlonal puede utilizarse como reactivo de captura o detección para CFD en fluidos biológicos como suero o plasma. Las parejas de anticuerpos y las concentraciones óptimas deben determinarse empíricamente.
• Debido a la naturaleza secretada del CFD, la preparación de la muestra puede requerir atención para evitar la degradación; es recomendable añadir inhibidores de proteasas y procesar las muestras a bajas temperaturas.

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