Anticuerpo monoclonal de conejo anti-factor H del complemento para WB, ELISA - P08603

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del factor H del complemento

• El factor H del complemento (CFH), también conocido como factor H 1, es una glucoproteína de 139 kDa secretada principalmente por el hígado y, en menor medida, por monocitos, fibroblastos, células endoteliales y el epitelio pigmentario de la retina.
• Como principal inhibidor soluble de la vía alternativa del complemento, el CFH evita la activación descontrolada del complemento al unirse a las superficies celulares propias y acelerar la descomposición de la convertasa de C3 en fase fluida y unida a la superficie (C3bBb). Referencias relacionadas: PMID:19503104 PMID:21317894 PMID:26700768
• El CFH actúa como cofactor para la escisión proteolítica de C3b mediada por el factor I del complemento, convirtiéndolo en iC3b y, de este modo, inactivando irreversiblemente el bucle central de amplificación de la cascada del complemento. Referencias relacionadas: PMID:18252712 PMID:23332154 PMID:28671664
• Además de regular el complemento, el CFH interactúa con el receptor de integrina CR3 (ITGAM) en los neutrófilos para promover la adhesión y la fagocitosis de patógenos, vinculando el control del complemento con las respuestas de las células inmunitarias innatas. Referencias relacionadas: PMID:20008295 PMID:9558116
• Durante la infección por Plasmodium falciparum en el intestino medio del mosquito, el CFH se une a las superficies de los gametocitos y protege al parásito de la destrucción mediada por la vía alternativa del complemento, lo que destaca su papel en las interacciones entre el huésped y el patógeno.
• El CFH contiene múltiples dominios sushi de repetición de consenso corto (SCR) que median sus funciones de unión a ligandos, y experimenta modificaciones postraduccionales, incluida la glucosilación, la sulfatación y la formación de enlaces disulfuro.
• Las mutaciones o polimorfismos en el gen CFH están asociados con la degeneración macular asociada a la edad (DMAE), el síndrome urémico hemolítico atípico (SHUa) y otros trastornos relacionados con el complemento, lo que subraya su importancia clínica.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 100–200 dentro de los dominios SCR del CFH; debe tenerse en cuenta que el anticuerpo puede reconocer tanto las formas nativas como las desnaturalizadas en condiciones reductoras y no reductoras, pero se recomienda la validación en el sistema de muestras objetivo.
• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 139 kDa en condiciones reductoras; utilice controles positivos adecuados (por ejemplo, lisado de hígado humano o suero) y marcadores de peso molecular.
• El anticuerpo está validado para ELISA; al diseñar un ELISA tipo sándwich, pruebe diferentes pares de anticuerpos de captura/detección e incluya controles de matriz pertinentes.
• Se ha informado reactividad cruzada para humanos; para otras especies, debe comprobarse la homología de secuencia y se recomienda la verificación experimental.
• El factor H del complemento es abundante en el suero; considere la dilución de las muestras y estrategias de bloqueo para minimizar los problemas de fondo elevado en los ensayos basados en suero.

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