Anticuerpo monoclonal de conejo anti-COPB2 para WB, IF/ICC, ELISA - P35606

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de COPB2

• COPB2 codifica la subunidad beta' del coatómero, beta'-COP (proteína de cubierta beta', p102), un componente central del complejo coatómero COPI implicado en el tráfico vesicular intracelular.
• El complejo coatómero se une a motivos de dilisina y se asocia reversiblemente con vesículas del Golgi sin cubierta de clatrina, mediando el transporte de proteínas biosintéticas desde el RE, a través del Golgi, hasta la red trans-Golgi.
• COPB2 es esencial para la gemación del Golgi y el transporte retrógrado del Golgi al RE de proteínas marcadas con dilisina, manteniendo la integridad estructural del Golgi y regulando el procesamiento, la actividad y el reciclaje endocítico de los receptores de LDL.
• COPB2 funciona como una proteína de unión selectiva (RACK) para la proteína quinasa C de tipo épsilon, conectando el tráfico de membrana con la señalización celular mediante la unión dependiente de GTP a las membranas del Golgi.
• La proteína se localiza predominantemente en el citoplasma, la membrana del aparato de Golgi y las membranas de las vesículas recubiertas de COPI, lo que subraya su función en la formación de vesículas COPI y la clasificación de la carga.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, que pueden modular el ensamblaje y la estabilidad del coatómero, así como sus interacciones con la carga y los factores reguladores.
• Las mutaciones en COPB2 están asociadas con microcefalia primaria (MCPH19) y osteoporosis, lo que pone de relieve sus funciones esenciales en la división celular y la homeostasis ósea.
• La proteína contiene dominios de repeticiones WD, que permiten interacciones proteína-proteína críticas para la integridad y función del complejo coatómero.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 657-906) abarca la región C-terminal de repeticiones WD; considere que el anticuerpo puede reconocer motivos estructurales conservados al evaluar la reactividad cruzada entre especies.
• Para Western blot, el peso molecular previsto es de 102 kDa; utilice un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, SDS-PAGE al 8 %) y optimice las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular.
• En inmunofluorescencia/ICC, se espera un patrón de tinción perinuclear similar al del Golgi; se recomienda la contratinción con un marcador del cis-Golgi (por ejemplo, GM130) para la validación.
• Para ELISA, emplee el inmunógeno recombinante como control positivo y estandarice las condiciones del ensayo con tampones de bloqueo y lavado adecuados.
• Verifique la especificidad del anticuerpo utilizando lisados celulares con COPB2 knockout o knockdown, si están disponibles, ya que COPB2 es esencial y su depleción puede afectar a la viabilidad celular.
• Para preservar la actividad del anticuerpo, alícuote y almacene a -20 °C o menos; evite ciclos repetidos de congelación-descongelación y la exposición prolongada a temperatura ambiente (se envía en una bolsa de hielo).

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