Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-COX IV para WB, IHC-P, ELISA - P13073

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de COX IV

• La subunidad 4 isoforma 1 de la citocromo c oxidasa (COX IV-1) es una subunidad codificada en el núcleo del complejo IV (citocromo c oxidasa), la enzima terminal de la cadena de transporte de electrones mitocondrial.
• Desempeña un papel crítico en la fosforilación oxidativa al contribuir al ensamblaje y regulación del holoenzima, que cataliza la reducción de oxígeno molecular a agua.
• La enzima acopla la transferencia de electrones desde el citocromo c al oxígeno con la translocación de protones a través de la membrana mitocondrial interna, generando el gradiente de protones esencial para la síntesis de ATP.
• COX IV-1 está codificada por el gen COX4I1 y se expresa de forma ubicua en tejidos humanos, con un peso molecular aproximado de 19,5 kDa para la proteína madura.
• La proteína se encuentra anclada en la membrana interna mitocondrial y se sintetiza con un péptido de tránsito escindible que dirige su importación a la mitocondria.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, que pueden modular la actividad y el ensamblaje del complejo IV.
• Las mutaciones en COX4I1 están asociadas a la deficiencia del complejo IV mitocondrial, tipo nuclear 16 (MC4DN16), un trastorno multisistémico grave.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado (péptido N-terminal dentro de los aminoácidos 1–100) indica que el epitopo reconocido se encuentra en una región conservada entre humano, ratón y rata, lo que sustenta la reactividad cruzada observada. Tenga esto en cuenta al diseñar ensayos de detección específicos de isoformas.
• Para Western blotting, el peso molecular predicho de COX IV es de ~20 kDa; valide la detección usando lisados de control positivo adecuados (por ejemplo, fracciones mitocondriales de HeLa, HEK293 o hígado de roedor).
• En inmunohistoquímica (parafina), deben aplicarse métodos estándar de recuperación de antígenos (tampón de citrato, pH 6,0, o EDTA, pH 9,0) y bloqueo de peroxidasa endógena; los patrones de expresión específicos de tejido pueden requerir optimización.
• Al realizar ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección para COX IV nativa o recombinante; la reactividad cruzada con el holocomplejo del complejo IV o subensamblajes puede influir en el diseño del ensayo, por lo que se recomienda una validación empírica.
• Incluya siempre controles correspondientes a la especie y, si estudia modelos de enfermedad, confirme la presencia de mutaciones que puedan alterar la accesibilidad del epitopo.

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