Anticuerpo policlonal de conejo Anti-COX8A para WB y ELISA - P10176

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la subunidad 8A de la citocromo c oxidasa

• El gen COX8A codifica la subunidad 8A de la citocromo c oxidasa, un polipéptido codificado en el núcleo del complejo IV de la cadena respiratoria mitocondrial (también conocido como polipéptido VIII hígado/corazón de la citocromo c oxidasa y COX8-2).
• Como componente de la citocromo c oxidasa (complejo IV), cataliza la reducción terminal del oxígeno a agua en la cadena de transporte de electrones, acoplando la transferencia de electrones a la translocación de protones a través de la membrana interna mitocondrial para impulsar la síntesis de ATP.
• El gen COX8A pertenece a una familia de subunidades codificadas en el núcleo que modulan estructuralmente el núcleo catalítico del complejo IV; pueden surgir isoformas alternativas de genes distintos como el COX8C.
• La proteína se localiza en la membrana interna mitocondrial a través de una hélice transmembrana; se sintetiza como un precursor con un péptido de tránsito N-terminal que se escinde después de la importación mitocondrial para obtener la forma madura de ~8 kDa.
• La ubiquitinación (conjugación de Ubl) se ha identificado como una modificación postraduccional que potencialmente regula la estabilidad o el ensamblaje de COX8A en el complejo.
• Las mutaciones en COX8A están vinculadas a enfermedades mitocondriales primarias, específicamente a la deficiencia del complejo IV mitocondrial tipo nuclear 15 (MC4DN15), lo que pone de relieve su papel esencial en la fosforilación oxidativa.
• Con una expresión generalizada en todos los tejidos humanos, COX8A apoya la función básica de la respiración mitocondrial en diversos tipos celulares.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los 69 aminoácidos del extremo N-terminal de la COX8A humana; se recomienda usar lisados enriquecidos en mitocondrias para mejorar la sensibilidad de detección de esta proteína de membrana interna de baja abundancia.
• Para Western blotting, use un gel de alto porcentaje (por ejemplo, 15% o de gradiente) adecuado para resolver proteínas de ~8 kDa y valide la banda frente al peso molecular predicho (UniProt: 7579 Da) con marcadores mitocondriales.
• En aplicaciones de ELISA, la naturaleza policlonal permite el reconocimiento de múltiples epítopos; realice titulaciones en tablero para determinar las concentraciones óptimas de anticuerpo y de recubrimiento de antígeno.
• Se indica reactividad cruzada con humano y ratón; para otras especies, alinee la secuencia del inmunógeno con la proteína diana para predecir la reactividad antes de usarla en el experimento.
• Dada la localización mitocondrial, el pretratamiento de las muestras con detergentes suaves puede mejorar la accesibilidad al epítopo, aunque se recomienda realizar pruebas empíricas.

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